CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

انگشت نگاری ژنومی مایکوباکتریوم بویس سویه ‭AN5 ‬مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی با استفاده از تکنیک ‭RFLP‬

عنوان مقاله: انگشت نگاری ژنومی مایکوباکتریوم بویس سویه ‭AN5 ‬مورد استفاده در تولید توبرکولین گاوی با استفاده از تکنیک ‭RFLP‬
شناسه ملی مقاله: R-1056679
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1391
مشخصات نویسندگان مقاله:

رضا عارف پژوهی
کیوان تدین
نادر مصوری
کیومرث سلیمانی
روح ا کشاورز
نفیسه شکیبامهر
عزت اله قهرمانلو
محمد محمدطاهری
علی شکیبامهر

خلاصه مقاله:
به منظور داشتن ‮‭10‬ نسل متوالی ده پاسا بر روی لوله های حاوی محیط کشت اختصاصی لوانشتاین جانسون پیروات دار‭((LJP ‬انجام شد و لوله ها به مدت 2 ماه در انکوباتور ‮‭37‬ درجه نگهداری گردید. از کلونی های رشد یافته هر لوله یک لوپ کامل باکتری استحصا ل و پس از غیر فعال سازی در دمای ‮‭80‬ درجه سانتی گراد عملیات استخراج ‭DNA ‬انجام گرفت .پس از ارزیابی کمی و کیفی ‭DNA ‬استخراج شده، هضم آنزیمی با استفاده از دو آنزیم ‭PvuII ‬و ‭AluI ‬به مدت یک شبانه روز در دمای ‮‭37‬ درجه سانتی گراد انجام گردید.در مرحله بعد انتقا ل ‭DNA ‬هضم شده بر روی آگارز %1 پروسه انتقال ‭DNA ‬از روی ل آگارز برروی ممبران با شار مثبت با تکنیک مویینگی انجام شد(ساترن بلاتینگ).سپس ‭DNA ‬منتقل شده بر روی نایلون در دمای‮‭120‬ درجه سنتیگراد به مدت ‮‭20‬ دقیقه تثبیت گردید وپس از عملیات هیبریداسیون با کمک پروب های ‭PGRS ‬و ‭DR‬، نهایتا" ممیرین حاصل با استفاده از ‭NBT ‬و ‭BCIP ‬رنگ آمیزی گردید. نتایج به دست آمده بیانگر وجود الگوهای مشابه در تمامی نسل های مورد بررسی در ‭DNA ‬هضم شده با آنزیمهای فوق بوده و هیچ گونه تفاوتی در تعداد باندها یا سایز ملکولی آنها مشاهده نشد.

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1056679/