فریبا گلچین فر
رسول مدنی
تارا امامی
ناصری

مایکوپلاسما آگالاکتیه یکی از مهمترین عوامل اصلی ایجاد عفونت های واگیردار در گله های گوسفند و بز بوده که مناطق وسیعی را درگیر می کند. این باکتری عامل بیماری با نام ص آگالاکسی واگیردار است که با علایم مختلفی از جمله عفونت و تورم پستان، قطع شیر، تورم قرنیه ملتحمه چشم، التهاب مفاصل، لنگش و گاهی سقط در حیوان مشاهده می شود. در ایران نیز این بیماری در اکثر استان های کشور شایع بوده و سالانه ضررها و خسارات اقتصادی قابل ملاحظه ای ایجاد می کند. به همین دلیل شناسایی مولکولی عوامل و فاکتورهای مسبب این بیماری حایز اهمیت فراوانی بوده و جهت تولید واکسنی مناسب و با کارایی بالاتر ضروری است. در این تحقیق ابتدا سعی گردید، با راه اندازی و بهینه سازی تکنیک ‭PCR‬، امکان تشخیص سریع، اختصاصی و با حساسیت بالای عامل بیماری فراهم آید. از آنجا که یک فاکتور اساسی، شاخص اختصاصی و ایمونوژن در عفونت زایی مایکوپلاسما (آگالاکتیه، پروتیین ‮‭40‬ کیلو دالتونی غشایی بنام ‭"P‬‮‭40‬" بوده که باکتری با اتصال به واسطه این پروتیین در سلولهای میزبان اثرات عفونی خود را اعمال می کند، لذا در مرحله بعد ایزوله های جدا شده از ایران به منظور شناسایی ژن مربوط به این پروتیین مورد بررسی مولکولی و ژنتیکی قرار گرفتند. در این پژوهش ژن P‮‭40‬ مایکوپلاسما آگالاکتیه ایزوله ایرانی، توسط تکنیک ‭PCR ‬تکثیر گردید. سپس جهت مطالعات بیشتر و تعیین توالی این قطعه ژنی، عملیات کلونینگ ژن P‮‭40‬ توسط وکتور ‭pTZ‬‮‭57‬‭R/T ‬درون سلولهای پذیرنده ‭E.coli ‬سویه ‭DH‬5 صورت گرفت. در بررسی مقایسه ای توالی نوکلیوتیدی ژن P‮‭40‬ ایزوله ایرانی، با توالی این ژن در سایر سویه های موجود در بانک ژن، با استفاده از برنامه ‭Blast‬، بیشترین نوکلیوتیدی (%‮‭99‬ ‭Identities) ‬با سویه های فرانسوی ،‮‭4021 4258‬ و سویه اسپانیایی ‭PG‬2 بدست آمد و کمترین تشابه نوکلیوتیدی (%‮‭84‬ ‭Identities) ‬با سویه فرانسوی ‮‭4212‬ گزارش شد. واژه های کلیدی : مایکوپلاسما آگالاکتیه آگالاکسی واگیردار تورم پستان کلونینگ ژن ‭ P‬‮‭40‬ ‭ PCR.