ردیابی و تشخیص هم زمان دو ویروس مهم بذرزاد لوبیا ( BCMV و BCMNV) با استفاده از روش Multiplex Reverse Transcription-PCR جهت بکارگیری در برنامه گواهی بذر کشور
عنوان مقاله: ردیابی و تشخیص هم زمان دو ویروس مهم بذرزاد لوبیا ( BCMV و BCMNV) با استفاده از روش Multiplex Reverse Transcription-PCR جهت بکارگیری در برنامه گواهی بذر کشور
شناسه ملی مقاله: R-1092226
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1392
شناسه ملی مقاله: R-1092226
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1392
مشخصات نویسندگان مقاله:
نوح شهرآیین
عباس سعیدی
عبدالباسط عزیزی
سحر وحیدحسین نیا
مهدی افضلی
خلاصه مقاله:
نوح شهرآیین
عباس سعیدی
عبدالباسط عزیزی
سحر وحیدحسین نیا
مهدی افضلی
ویروس موزاییک معمولی لوبیا (BCMV) و ویروس موزاییک معمولی نکروتیک لوبیا (BCMNV) در اغلب مناطق کشت لوبیا در دنیا از پراکنش گسترده ای برخوردار میباشند. آلودگی مزارع لوبیا و خسارت ناشی از این دو پوتی ویروس potyvirus) (از مناطق مختلف کشت و پرورش لوبیا در ایران گزارش شده است. در صورت استفاده از روشهای متعارف تشخیصی مثل سنجش سرولوژیکی الایزا ( ELISA ) آلودگی توام به این دو ویروس در نمونه های لوبیای آلوده مشاهده میگردد. روشهای تشخیص مولکولی برای شناسایی این دو ویروس و سایر ویروسهای آلوده کننده لوبیا راه اندازی شده اند، اما تاکنون روش Multiplex RT- PCR برای تشخیص همزمان این دو ویروس در ایران و در یک نمونه ارایه نشده است. بنابراین هدف از این تحقیق راه اندازی و توسعه سیستم Multiplex RT- PCR برای تشخیص همزمان این دو ویروس در یک نمونه است. تلفیقی از پرایمرهای اختصاصی و پروب های مختلفی برای تشخیص دو ویروس BCMVو BCMNV طراحی و بهینه سازی گردید. واکنشهای مولکولی مختلفی بصورت تکی (uniplex)و چندتایی بطور همزمان جهت رفع مشکلات و کاستی های مراحل تشخیص همزمان این دو ویروس بصورت تقاطعی صورت گرفت. واکنشهای تشخیص همزمان این دو ویروس با اندک تفاوتی در واکنشهای تکی و چندتایی موفقیت آمیز بود. بکارگیری این روش در تشخیص همزمان چند ویروس نه تنها در بهبود و توسعه روشهای تشخیصی از نقطه نظر کاهش در زمان و هزینه آزمایشات چند مرحله ای موثرند، بلکه به عنوان یک ابزار در دسترس جهت مطالعات اکولوژیکی و اپیدمیولوژیکی ، بررسی سلامتی بذور از عوامل بیماریزای بذر زاد ، روابط متقابل میزبان و عامل بیماریزا مفید واقع خواهند شد، بخصوص در حالتی که یک میزبان ( لوبیا) به هر دو عامل بیماریزا آلوده شده باشد. واژه های کلیدی : تشخیص مولکولی-آزمون مالتی پلکس پی سی ار- ویروس لوبیا ، آلودگی همزمان
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1092226/