منیره مرتضائی - گروه زیست شناسی دانشکده علوم پایه دانشگاه پیام نور
مهدی دادمهر - گروه زیست شناسی دانشکده علوم پایه دانشگاه پیام نور
بهناز کروژدهی - گروه بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی دانشگاه تهران

هدف از انجام این آزمایش تشخیص فعالیت ژلاتینازی باکتری ها به صورت کمی و بر اساس اثر هیدرولیز آنزیم ژلاتیناز بر خاصیت رزونانس پلاسمون سطحی و مبتنی بر نانوذرات طلا می باشد. یک روش ساده و حساس برای تشخیص فعالیت ژلاتیناز باکتری ها بر اساس اثر هیدرولیز آنزیم ژلاتیناز بر رزونانس پلاسمون سطحی SPR نانوذرات طلای عملکردی ژلاتین AuNP ژلاتین در مایع رویی باکتری ها ایجاد شده است. خصوصیات نانوذرات سنتز شده رسوب لایه ژلاتین بسیار نازکی را بر روی سطح AuNP ها نشان داد که باعث ایجاد برخی تغییرات در خاصیت SPR در AuNP ها شد. سوپرناتانت استخراج شده باکتری های استفاده شده با AuNP های عامل دار ژلاتین انکوبه شدند. فعالیت ژلاتیناز باکتری ها منجر به حذف پوسته ژلاتین و تشکیل نانوذرات طلا می شود. متعاقبا وجود نمک به عنوان ماده اصلی در محیط باکتریایی منجر به فرآیند تجمع AuNP ها شد. هنگامی که سوپرناتانت باکتری با فعالیت ژلاتیناز به واکنش اضافه می شوند ، یک تغییر رنگ قابل مشاهده از محلول کلوئیدی AuNPs از قرمز به بنفش مشاهده شد. همچنین مشاهده شد که بیشترین فعالیت باکتری های ژلاتیناز منجر به انحلال AuNP و از بین رفتن مشخصه SPR می شود. بنابراین ، کاهش جذب مشاهده شده در طیف UV- Vis در ۵۲۹ نانومتر به عنوان فعالیت ژلاتیناز باکتری های اعمال شده نشان داده شد. در میان سویه های باسیلوس بررسی شده در مطالعه حاضر ، بیشترین اثر فعالیت ژلاتیناز در سویه باسیلوس سوبتیلیس مشاهده شد

آنزیم ، باکتری باسیلوس ، تشخیص رنگ سنجی ، ژلاتیناز ، نانوذرات طلا