سیما زندوکیلی - گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
نرگس معماری زاده - بخش تحقیقات آفت کش ها، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران
محمد قدمیاری - گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
علی علیزاده - گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ولی عصر رفسنجان
رضا حسن ساجدی - گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

آنزیم گلوتاتیون اس- ترنسفراز (GST) از حشرات بالغ پسیل پسته، Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer به واسطه رسوب گذاری سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی میل ترکیبی با بکارگیری ستون Glutathione Sepharose ۴B جداسازی و خالص شد. آنزیم خالص شده بصورت تک باند درSDS-PAGE  ظاهر شد و وزن مولکولی آنزیم ۴/۲۸ کیلو دالتون تخمین زده شد. آنزیم از پسیل پسته به صورت ۲۷/۳۹ برابر و با درصد بازیابی  ۳۷/۱۲ خالص سازی شد و آنزیم خالص شده، فعالیت ویژه ۰۸/۳۰ U mg-۱ protein نشان داد. دما و pH بهینه فعالیت آنزیم به ترتیب ۳۰ درجه سلسیوس و ۹ به دست آمد. مقادیر Km  و Kcat برای سوبسترای  GSH (Glutathione) به ترتیب ۴۴/۰ mM و ۹/۱۵۲ s−۱ محاسبه شد و برای سوبسترای CDNB (۱-chloro-۲,۴-dinitrobenzene) ۳۳/۰ mM و ۷/۲۰۷ s−۱ به دست آمد. فعالیت آنزیم GST به طور کامل  با اضافه کردن EDTA، ZnCl۲  و SDSمتوقف شد، این در حالی است که CaCl۲، BaCl۲، CoCl۲، Hg۲Cl۲، MgCl۲،Urea، MnCl۲ وKCl  به طور جزئی فعالیت آنزیم را متوقف کرد. مطالعات بازدارندگی in vitro نشان داد که تمام آفت­ کش ­های شیمیایی (از جمله: ایمیداکلوپرید، استامی پراید، فوزالون و آمیتراز) بر فعالیت آنزیم خالص شده GST اثر بازدارندگی دارند. نتایج مطالعه ما با گسترش اطلاعات بیوشیمیایی آنزیم GST حاصل از پسیل معمولی پسته، به درک مکانیسم های مقاومت در این آفت کلیدی کمک می کند.

گلوتاتیون اس – ترنسفراز, خالص سازی, Aganosena pistaciae, اثر بازدارندگی