عطیه هاشمی - انستیتو پاستور ایران، بخش هپاتیت و ایدز، تهران
فرزین روحوند - انستیتو پاستور ایران، بانک ژن نوترکیب ایران
محمدحسین قهرمانی - دانشگاه تهران، دانشکده ی داروسازی، تهران

در واکنش زنجیره ای پلیمر از در زمان واقعی (RT-qPCR) برای دستیابی به داده های دقیق و قابل اعتماد در شرایط مختلف آزمای، بررسی پایداری بیان ژنهای مرجعی که به منظور نرمالیزه کردن نتایج بکار می روند، امری ضروری است. هدف: مطالعه حاضر اولین مطالعه ای است که به منظور بررسی ثبات بیان ژنهای مرجع در رده های سلولی سرطان کبد که تحت تأثیر غلظتهای مختلف اینترفرون آلفا در زمانهای مختلف قرار گرفته اند ترتیب داده ده است. بدیهی است که در بررسی بیان ژنها در سلولهای کبدی تحت تأثیر اینترفرون، انتخاب پایدارترین ژن مرجع برای نرمالیزه کردن نتایج، اولین گام می باشد. این مطالعات در راستای دستیابی به مکانیسمهای ملکولی تداخل پروتئینهای ویروسی با مسیر سیگنالیگ اینترفرون و مقاومتهای دارویی مؤثر خواهند بود. روش: به این منظور ترتیب پایداری پنج ژن مرجع (ACTB, GAPDH, HMBS, HPRT-1, TBP) بکمک نرم افزار geNorm تعیین شد. نتیجه: نتایج نشان داد که دو ژن HPRT-1 و GAPDH و سه ژن ACTB, HMBS و GAPDH به ترتیب در رده های سلولی Huh-7 و( HepG(2 که تحت تأثیر اینترفرون آلفا قرار گرفته اند پایدارترین ژنهای مرجع می باشند. TBP یکی از ناپایدارترین ژنهای مرجع در گروه های مورد مطالعه بوده است.

؛RT-qPCR، ژن مرجع، اینترفرون آلفا، geNorm