صدیقه نصررمزی - کارشناس ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی دانشگاه گیلان
محمدمهدی سوهانی - عضو هیئت علمی دانشگاه گیلان

تکنیک ترانسفورماسیون به روش in planta با واسطه ی اگروباکتریوم، به عنوان یک رویکرد مطلوب برای انتقال ژن محسوب می شود. در این رو خاص از سوزن آلوده با محلول اگروباکتریوم به منظور تلقیح بذور برنج در حال جوانه زنی استفاده شد. بدین منظور سویه های اگروباکتریوم LBA4404 و HEA105 کشت داده شدند و ترانسفورماسیون رقم غریب برنج انجام شد. ترانسفورماسیون ژنتیکی گیاهان توسط واکنش PCR با استفاده از آغازگرهای پرومتور CaMV35S، ترمیناتور nos-term ، ژنهای hygromycin-R, GUS-Plus و Spectinomycin-R تأئید شد. تست گاس بهمنظور بررسی تظاهر ژن بتاگلوکورونیداز انجام شد. رنگ آبی در بافت گیاهان ترانسژنیک ظهور یافت. نمونه ها با طرح آمای کاملاً تصادفی در شش تکرار بررسی شدند. بر این اساس سویه ی EHA105 در حضور غلظت 100 Μm استوسرینگون بالاترین کارایی ترانسفورماسیون (39/54%) را نشان داد.

آزمون هیستوشیمیایی گاس، روش in planta، کارایی ترانسفورماسیون