آمنه مهری قهفرخی - دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد
بهناز صفار - گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد- پژوهشکده زیست فناوری، شهرکرد
محسن مبینی دهکردی - گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد
محسن پولادیان - دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، دانشگاه شهرکرد

مقدمه: یکی از استراتژیهای حفاظتی ارگانیسمها در برابر آسیب های ناشی از فلزات در سطح مولکولی و سلولی القای سنتز متالوتیونینها (MT) است. این پروتئینها می توانند باعث خنثی شدن مقادیر اضافه فلزات سنگین در سلول شده و از ساختارهای سلول در مقابل میانکنشهای غیراختصاصی با فلزات سنگین محافظت کنند. در حال حاضر از باکتریها و گیاهان و محصولات پروتئینی آنها به منظور برداشت فلزات سنگین از محیط استفاده می شود. هدف: هدف از این مطالعه، همسانه سازی ژن متالوتیونینsmtA از باکتتری Synechococcus PCC7942 و بیان آن می باشد. روشها: ژن smtA از طریق اتصال اولگونوکلئوتیدهای مربوطه (سفارش و خریداری از شرکت TAG Copenhagen) توسط تکنیک Overlapping PCR سنتز و در ناقل همسانه سازی T/A، همسانه سازی و در باکتری (E.coli(DH5α تراریخت شد. صحت تراریختی با Colony-PCR بررسی و توالییابی انجام شد. سپس ژن به داخل ناقل بیانی pET15b زیرهمسانه سازی و در باکتری (E.coli(BL21 تراریخت گردید. القای بیان ژن توسط IPTG انجام شد و تولید پروتئین توسط SDS-PAGE بررسی شد. نتایج: توالی یابی، صحت تراریختی را تأئید کرد. SDS-PAGE نشان داد که تولید پروتئین نسبت به نمونه کنترل، بیشتر شده است.

متالوتیونین، IPTG, smtA