مونا جلالی - کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران
حمیده افقی - استاد راهنما،پژوهشکده بیوتکنولوژی_سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران_تهران
پرستو احسانی - استاد مشاور،انسیتو پاستور ایران_تهران

آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت B به دلیل قدرت ایمنی زایی بالا، موثرترین پروتئین برای ساخت واکسن بیماری ویروسی هپاتیت B میباشد. در این پروژه بیان موقت آنتی ژن سطحی هپاتیت B به روش اگرواینفیلتراسیون یا انتقال ژن تحت خلاء توسط اگروباکتریوم برای تولید این پروتئین نوترکیب در گیاه اسفناج استفاده شد. آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت B در وکتور گیاهی pBI 121 تحت پروموتور Pcamv35S ترمیناتور Nos کلون شد. پلاسمید نوترکیب pBI121 با روش ذوب-انجماد به Agrobactrium tumefacienesسویه GV3850 منتقل شد، بیان موقت پروتئین را سه تا هفت روز بعد از نفوذ می توان تشخیص داد. میزان بیان پروتئین نوترکیب به روش آزمایشگاهی بیوشیمیائی الایزا با کیت HBs Ag Biolisa اندازه گیری شد که در حدود 12% و 1/1% کل پروتئین محلول گیاه می باشد. این بررسی حاکی است که گیاه اسفناج و توتون می تواند به عنوان میزبان تولید پروتئین های نوترکیب، در ساخت واکسن ها به کار رود.

ویروس هپاتبت B،پروتئین های نو ترکیب،گیاه تراریخته،اسفناج،توتون