سیدعلی قرشی - گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
مرتضی دلیری جوپاری - گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
دینا مرشدی - گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران
ترانه حاجیان - گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران

در این مطالعه یک روش Nested-PCR برای تشخیص دو ویروس BVDV از سویه NADL بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR قسمتی از منطقه غیرقابل ترجمه ناحیه 5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR دروکتور pTZ57R/T کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تأیید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انخاب و ازمایش Nested-PCR انجام گردید و یک قطعه DNA به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش 10TCID(5), RT-PCR و میزان حساسیت آزمایش Nested-PCR در تشخیص ویروس BVDV در کشت سلول، (10TCID(50 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت های سلولی با سه روش PCR, ELISA و Nested-PCR مورد ازمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه ها نسبت به روش ELISA بیشتر می باشد.

؛pestivirnu، آلودگی کشت سلولی، PCR