علیرضا شناور ماسوله
مهدی سلطانی
جلیل جلیل پور
مهدی علیزاده

در این تحقیق میزان فلور باکتریایی هوازی اسپرم ، تخم، لارو با کیسه زرده و لارو بدون کیسه زرده به همراه آب پرورشی آنها مورد ارزیابی قرار گرفت . جهت بررسی فلور تخم در هر یک از مراحل زمانی دوره پرورش ( اول - وسط - آخردوره ) ، نمونه برداری بصورت تصادفی در سه تکرار با حداقل 60 عدد تخم از هر انکوباتور ( مجموعاُ 180 عدد تخم از سه انکوباتور ) صورت گرفت . نمو نه برداریها 48 ساعت پس از لقاح انجام گردید . نمونه ها سه بار با سرم فیزیولوژی استریل %) 0/9) شستشو داده و سپس در نهایت در 5 میلی لیتر سرم فیزیولوژی استریل محلول هموژن تهیه گردید . پس از تهیه رقت های لازم ، 0/1 میلی لیتر از رقتها بر روی محیط کشت تریپتیک سوی آگار TSA به روش کشت سطحی تلقیح انجام شد و پلیت ها در دمای 20 درجه سانتی گراد به مدت 3-5 روز مورد ارزیابی قرار گرفت . کلنی ها شمارش شده و CFU به ازای تخم محاسبه گردید . همزمان آب پرورشی نیز از رقتهای مختلف به میزان 0/1 میلی لیتر به شرح فوق کشت داده شد . کلنی ها شمارش شده و CFU به ازای هر میلی لیتر آب محاسبه گردید . در بررسی لاروها نیز در هر یک از مراحل زمانی دوره پرورش ( اول - وسط - آخردوره ) ، نمونه برداری بصورت تصادفی در سه تکرار با حداقل 60 عدد لارو از هر ونیرو ( مجموعاُ 180 عدد لارو از سه ونیرو ) صورت گرفت . نمونه برداریها در مرحله لاروی با کیسه زرده و 5 روز پس از شروع تغذیه فعال انجام گردید . نمونه ها سه بار توسط سرم فیزیولوژی استریل %) 0/9) شستشو شده و سپس نمونه ها به مدت 15 دقیقه در محلول % 0/01 پویدون یدین ( یک میلی لیتر بتادین در یک لیترآب مقطر ) قرار گرفتند . در ادامه مجددا سه بار توسط سرم فیزیولوژی استریل شستشو انجام داده و سپس در 5 میلی لیتر از سرم فیزیولوژی محلول هموژن تهیه گردید . 0/1 میلی لیتر از رقتهای مختلف محلول هموژن بر روی محیط کشت تریپتیک سوی آگار TSA به روش کشت سطحی تلقیح انجام داده و پلیت ها در دمای 20 درجه سانتی گراد به مدت 3-5 روز مورد ارزیابی قرار گرفت . کلنی ها شمارش شده و CFU به ازای لارو محاسبه گردید . همزمان آب پرورشی نیز از رقتهای مختلف به میزان 0/1 میلی لیتر به شرح فوق کشت داده شد، کلنی ها شمارش شده و CFU به ازای هر میلی لیتر آب محاسبه گردید . نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که لگاریتم شمارش باکتریها بر اساس CFU در اسپرم ) 4/07-4/81) ، تخم (5/46-5/69) ، آب انکوباتور حاوی تخم (4/49-4/96) ، لارو با کیسه زرده (1/73-3/50) ،، آب پرورشی لارو با کیسه زرده (4/43-6/25) ،، لارو (5/20-5/92) ، و آب پرورشی لارو (3/47-5/57) بوده است . همچنین درصد لقاح (36-93) ، درصد هچ (25 -58) و درصد بقای لارو در ونیرو(71 -76)محاسبه گردید . نتایج ارتباط معنی داری آماری را بین فلور باکتریایی تخم و اسپرم r 0/ 99، p< 0/05) = ( نشان داده است ولی در سایر فاکتورهای مورد بررسی ارتباط معنی داری آماری مشاهده نگردید