محلول سازی و تا خوردگی مجدد اجسام اینکلوژن پروتئین نو ترکیب پوششی ویروس برگ باد بزنی مو تولید شده در Escherichia coli
عنوان مقاله: محلول سازی و تا خوردگی مجدد اجسام اینکلوژن پروتئین نو ترکیب پوششی ویروس برگ باد بزنی مو تولید شده در Escherichia coli
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-11-1_008
منتشر شده در شماره 1 دوره 11 فصل در سال 1398
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-11-1_008
منتشر شده در شماره 1 دوره 11 فصل در سال 1398
مشخصات نویسندگان مقاله:
راضیه یزدانی - گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
سید شهریار عرب - گروه بیوفیزیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس
افشین حسنی مهربان - گروه ویروس شناسی، دانشگاه واخنینگن، واخنینگن، هلند
مسعود شمس بخش - دانشگاه تربیت مدرس
خلاصه مقاله:
راضیه یزدانی - گروه بیماری شناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
سید شهریار عرب - گروه بیوفیزیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس
افشین حسنی مهربان - گروه ویروس شناسی، دانشگاه واخنینگن، واخنینگن، هلند
مسعود شمس بخش - دانشگاه تربیت مدرس
هدف: سطوح بالای بیان ژن های خارجی در سلول های میزبان به ویژه در باکتری ها اغلب منجر به تشکیل اجسام اینکلوژن[1] میشود. وجود اسیدآمینه سیستئین در ساختار پروتئینها به تشکیل این اندامک نیز کمک میکند. پیوندهای دیسولفیدی درون و بینمولکولهای پروتئین غنی از سیستئین پوششی ویروس برگ بادبزنی مو باعث تشکیل اجسام اینکلوژن پس از بیان در Escherichia coli میشود. از اینرو به منظور بهدست آوردن پروتئین نوترکیب با ساختار طبیعی، ضروری است پروتئینهای تولید شده در سلول باکتری به شکل محلول درآیند. مواد و روش: در مطالعه حاضر برای تاخوردگی مجدد ساختار پروتئینها از حلال آمفیپاتیک 2 متیل 2،4پنتان دیول (MPD) در حضور سدیم دودسیل سولفات (SDS) استفاده شد. به این منظور ابتدا اجسام اینکلوژن حاوی پروتئین پوششی نامحلول ویروس برگ بادبزنی مو با استفاده از عامل دناتوره کننده سدیم دودسیل سولفات محلول شد. سپس پروتئین پوششی محلول با استفاده از روش کروماتوگرافی اندازه[2] خالصسازی شد و در نهایت پروتئینهای پوششی خالص با استفاده از روش MPD/SDS تاخورده شدند. نتایج: تصاویر میکروسکوپ الکترونی عبوری تاخوردگی مجدد ذرات شبهویروسی برگ بادبزنی مو را تایید کرد. نتیجه گیری: به نظر میرسد حلال MPD سبب تعدیل خواص دناتوره کننده سدیم دودسیل سولفات شده و به این ترتیب روشی ساده، کارآمد و موثر برای تاخوردگی مجدد پروتئین پوششی غنی از سیستئین ویروس برگ بادبزنی مو معرفی شد. [1]- inclusion body [2]- size exclusion chromatography
کلمات کلیدی: پروتئین غنی از سیستئین, کروماتوگرافی اندازه, میکروسکوپ الکترونی
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/864823/