زهره قمبری - دانشگاه خوارزمی، دانشکده علوم زیستی، گروه علوم سلولی و مولکولی، تهران، ایران
محمد نبیونی - دانشگاه خوارزمی، دانشکده علوم زیستی، گروه علوم سلولی و مولکولی، تهران، ایران
هانیه جلالی - دانشگاه خوارزمی، دانشکده علوم زیستی، گروه علوم جانوری، تهران، ایران
لطیفه کریم زاده - دانشجوی دکترا زیست شناسی سلولی تکوینی جانوری دانشگاه تهران‫، دانشکده زیست شناسی، پردیس علوم، تهران، ایران‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬

هدف: در پژوهش حاضر بیان ژن Cdc42 در سلول های Calu-6 مربوط به کارسینومای ریه با استفاده از سیستم مهاری shRNA کاهش یافته و اثرات این کاهش بر رشد و تکثیر سلولی بررسی شد.مواد و روش ها: به‫منظور کاهش بیان ژن Cdc42 از مکانیسم مهاری shRNA استفاده شد. سیستم لنتی ویروسی برای رسانش shRNA اختصاصی ژن Cdc42 به سلول های Calu-6 انتخاب شد. لنتی ویروس های نوترکیب به‫کمک لیپوفکتامین و از طریق ترانسفکشن هم‫زمان سه پلاسمید pMD2G، psPAX2 و p-GFP-C-shLenti به‫درون سلول های 293T تولید شد. سلول های Calu-6 تحت تیمار با لنتی ویروس نوترکیب قرار گرفتند. صحت ترانسداکشن با میکروسکوپ فلورسنس مورد بررسی قرار گرفت. بررسی ماندگاری زیستی سلول های Calu-6، با انجام سنجش MTT انجام شد.نتایج: بررسی های میکروسکوپ فلورسنس در 48 ساعت پس از ترانسفکشن نشان داد حدود 80 درصد سلول های 293T ترانسفکت شدند.نتایج میکروسکوپ فلورسنس پس از تیمار سلول های Calu-6 با ویروس نشان دهنده صحت ترانسداکشن این سلول ها است سنجش MTT نیز نشان داد که سرعت رشد سلول های ترانسداکت شده با لنتی ویروس حاوی Cdc42-shRNA در مقایسه با سلول های کنترل، 58 درصد و نسبت به سلول‎های کنترل منفی 40 درصد کاهش یافت.نتیجه گیری: لنتی ویروس های نوترکیب، وکتورهای مناسبی جهت انتقال shRNA-Cdc42 به سلول های Calu-6 بوده و این انتقال منجر به کاهش تکثیر سلول های Calu-6 شد. کاهش میزان تکثیر سلول های سرطان ریه به‫واسطه سیستم مهاری لنتی ویروسی- shRNA یک اثر پایدار و طولانی مدت می باشد که می تواند در ژن درمانی این سرطان مورد توجه قرار گیرد. 

لنتی ویروس, سرطان ریه, ژن درمانی, shRNA, Cdc42