دستیابی به دانش فنی تولید فیتاز میکروبی جهت استفاده در تغذیه طیور در سطح آزمایشگاه

تولید فیتاز: در این تحقیق، قارچ ها و باکتری های بومی تولیدکننده فیتاز از خاک و دیگر نمونه های محیطی جداسازی شدند و بر اساس میزان تولید آنزیم، تعدادی از گونه ها انتخاب گردیدند. سپس مقدار آنزیم تولیدشده در محیط کشت های مختلف، pH و دماهای مختلف بررسی گردید. درنهایت، سویه های باکتریایی و قارچ های جداسازی شده، با استفاده از روش های مولکولی و توالی یابی با دستگاه ژنتیک آنالایزر شناسایی گردید. نتایج حاصل با استفاده از نرم افزارSPSS ارزیابی شد. سویه های باکتریایی شناسایی شده در این تحقیق Erwinia carotovora ، Bacillus subtilis و Klebsiella oxytoca بودند. بهترین محیط غربالگری جهت جداسازی باکتری ها، محیط کشت حاوی سبوس گندم و بیشترین مقدار تولید آنزیم در روز پنجم پس از کشت ثبت شد. همچنین حداکثر فعالیت آنزیمی Bacillus subtilis و Klebsiella oxytoca در دمای 50 درجه سانتی گراد و pH ،7/5 و 5/5 به ترتیب بود. حداکثر فعالیت آنزیمی Erwinia carotovora نیز دمای 40 درجه سانتی گراد و pH، 5/5 به دست آمد. قارچ های جداسازی شده Aspergillus niger و oxysporium Fusarium بودند. بهترین محیط غربالگری برای این قارچ ها محیط کشت حاوی سبوس گندم و حداکثر فعالیت آنزیمی آن ها در5/5 pH= و دمای 30 درجه سانتی گراد ثبت گردید. خصوصیات مورفولوژیکی سویه های قارچی با استفاده از میکروسکوپ نوری (Nikkon K, Japan) موردبررسی قرار گرفت. قارچ های فوزاریم اگزیسپروم با 130/11 واحد آنزیمی و آسپرژیلوس نایجر با 125/27 واحد آنزیمی با بیشترین مقدار تولید فیتاز شناسایی و محدوده روز پنجم تا هفتم برای مرحله استخراج و خالص سازی به عنوان بهترین زمان معرفی شدند.آزمون مزرعه ای فیتاز تولیدی: در این آزمایش از 750 قطعه جوجه نر نژاد آرین با 6 تیمار، 5 تکرار و 25 قطعه جوجه در هر تکرار استفاده گردید. جوجه ها پس از تهیه از جوجه کشی وارد سالن شده و به مدت 42 روز نگهداری شدند. در طول انجام آزمایش سیستم نوری به صورت 24 ساعت روشنایی، جیره بر پایه ذرت و سویا و به صورت آزاد و بدون محدودیت در اختیار طیور قرار گرفت. جیره آزمایشی شامل 1) جیره شاهد که فسفر موردنیاز آن توسط دی کلسیم فسفات تامین می شد. 2) جیره فیتاز که فیتاز آن با استفاده فیتاز وارداتی 10000 و به میزان 5 گرم در 100 کیلوگرم جیره تامین می شد 3) جیره فیتاز که فیتاز آن با استفاده از فیتاز وارداتی 5000 و به میزان 10 گرم در 100 کیلوگرم تامین می گردید 4) جیره فیتاز که جهت تامین فسفر از فیتاز تهیه شده از باکتری به میزان 10 گرم در هر 100 کیلوگرم جیره استفاده گردید 5) جیره فیتاز که فسفر آن به واسطه فیتاز قارچی استخراج شده از آسپرژیلوس و به میزان 10 گرم در کیلوگرم جیره تامین گردید 6) جیره فیتاز که جهت تامین فسفر از فیتاز استخراج شده از سبوس برنج و به میزان 10 گرم در 100 کیلوگرم جیره استفاده گردید. در جیره های فیتاز ماتریس تغذیه ای با رعایت کاهش 53 کیلوکالری انرژی قابل متابولیسم در کیلوگرم جیره و میزان 0/12 درصد فسفر و کلسیم اعمال گردید. صفات عملکردی، خصوصیات لاشه، صفات کیفی استخوان بین فی تازه ای تجاری و فیتاز تولیدی وجود نداشت و این امر بیانگر قابلیت مناسب فیتاز تولیدی می باشد.کلمات کلیدی: فیتاز، باکتری های تولیدکننده فیتاز، قارچی تولیدکننده فیتاز، جوجه های گوشتی