بررسی چند شکلی ژنهای موثر بر صفات رشد IGFI و کالپاستاتین در گوسفندان زل

تنوع ژنتیکی ماده اصلی در برنامه های اصلاحی بر اساس انتخاب است و پیشرفت ژنتیکی بسنگی مستقیم به میزان تنوع مطلوب از حیث صفت مورد بررسی دارد. بخشی از تفاوتهای قابل مشاهده داخل و یا بین جمعیتها به چند شکلی ژنتیکی در جایگاههای مختلف مربوط است.ژنهای کالپاستاتین و IGF I بخاطر اثرات فیزیولوژیکی وسیعی که محصول آنها بر روی بسیاری از صفات رشد و کیفیت گوشت دارند به عنوان ژنهای کاندیدا برای بسیاری از این صفات مد نظر می باشند. برای بررسی چندشکلی قطعه ا ی از ژن IGF I در 142 راس گوسفندان زل، از دو نشانگر SSCP و RFLP استفاده شد. در روش استفاده از نشانگر SSCP واسرشته سازی قطعه ی تکثیر شده در واکنش زنجیره ای پلیمراز انجام شد و قطعات پس از واسرشته سازی در ژل پلی-اکریلامید 12% دوانیده شدند. در روش استفاده از نشانگر RFLP، قطعات تکثیر شده در واکنش زنجیره ای پلیمراز بوسیله ی آنزیم محدود کننده ی HaeII به مدت 4 ساعت در دمای 37 درجه ی سانتی گراد مورد هضم آنزیمی قرار گرفتند. پس از هضم آنزیمی، نمونه ها روی ژل آگارز 5/3% محتوی اتیدیوم بروماید دوانیده شدند. چندشکلی های بدست آمده از هر دو روش شامل دو آلل و سه ژنوتیپ بود. آلل ها شامل A و B با فراوانی های به ترتیب 71/0 و 29/0 و ژنوتیپ ها شامل AA، AB و BB با فراوانی های به ترتیب 47/0، 47/0 و 06/0 بدست آمدند. داده های بدست آمده برای بررسی شاخص های ژنتیک جمعیت بوسیله ی نرم افزار PopGene32 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند و مشخص شد که جمعیت مورد مطالعه در تعادل هاردی-وینبرگ قرار دارد. تکثیر نواحی اگزون و اینترون یک قسمت ابتدایی ژن کالپاستاتین در گوسفندی زل به طول 622 جفت باز با آغازگرهای اختصاصی و بر اساس واکنش زنجیره ای پلی مراز(PCR) صورت گرفت. برای مشاهده محصولات PCR از ژل آگارز 2/1 درصد با رنگ آمیزی اتیدیوم برماید استفاده شد. به منظور برش آنزیمی قطعات DNA تکثیر شده حاصل از PCR ،از آنزیم MspI استفاده شد. محصولات هضم شده با آنزیم بر روی ژل آگارز 2 درصد الکتروفورز شده و مجددا با اتیدیوم برماید رنگ آمیزی گردید. در این نژاد، دو نوع آلل A و B و سه نوع ژنوتیپ AA ، AB وBB مشاهده شد فراوانی آلل های A وB به ترتیب 86/0 و 14/0 و فراوانی ژنوتیپ های AA ، AB و BB به ترتیب برابر 33/78 ، 15 و 66/6 درصد بدست آمد. نتایج این تحقیق نشان داد که جمعیت مورد بررسی برای جایگاه ژن کالپاستاتین در تعادل هاردی واینبرگ قرار ندارد.واژه گان کلیدی: گوسفند، ژن کاندیدا، کالپاستاتین، IGF I ، رشد