تولید آنتی ژن های پیکری مایکوباکتریم فلیی برای تولید سیستم ‭absorbed ‬یون

مایکوباکتریوم ایویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس‭Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis (MAP) ‬عامل بیماری پاراتوبرکلوزیس‭(paratuberculosis) ‬یا ‭johns disease (‬التهاب روده نشخوارکنندگان اهلی)، یک بیماری مورد توجه از لحاظ سازمان بهداشت جهانی حیوانات‭(OIE) ‬و به عنوان بیماری اپیدمیک تیپ ‭B ‬می باشد. تکنیک های مختلفی برای تشخیص عفونت پاراتوبرکلوزیس مورد استفاده قرار می گیرد که روش الایزا به دلیل راحتی و حساسیت و ویژگی مناسب بیشتر مورد توجه بوده است. دو سیستم الایزا ی غیر مستقیم جذبی و غیر جذبی برای این منظور طراحی شده است که در روش الایزای جذبی به علت استفاده از آنتی ژن های مایکوباکتریوم فلیی، آنتی بادی های غیر اختصاصی حذف و باعث افزایش ویژگی تست می شود. در واقع هدف از این مطالعه استخراج آنتی ژن های مایکوباکتریوم فلیی و استفاده از ان در طراحی یک سیستم الایزای جذبی جهت ردیابی آنتی بادی و تشخیص عفونت پاراتوبرکلوزیس در گاو می باشد. برای این منظور از آنتی ژن ‮‭34‬ کیلودالتون که در بخش بیوتکنولوژی موسسه رازی در تخلیص شده بود استفاده و بر اساس غلظت های مختلف مایکوباکتریوم فلیی چکربورد انجام گرفت و بهترین غلظت آنتی ژن مایکوباکتریوم فلیی برای جذب آنتی بادی های غیر اختصاصی تعیین گشت. با استفاده از فرمول ‭Mean+‬2‭S/D ‬مقدار ‭Cutoff ‬تعیین شد و از این ‭Cutoff ‬برای تعیین حساسیت و ویژگی تست طراحی شده برای ‮‭386‬ سرم در مقایسه با نتایج کیت تجاری ‭IDEXX ‬مشخص گردید. ارزیابی چکربورد بهترین غلظت آنتی ژن مایکوباکتریوم فلیی را ‮‭50‬ میکروگرم نشان داد از طرفی مقدار ‭Cutoff ‬جدید برابر با.‮‭350.0‬ تعیین گردید. حساسیت و ویژگی این تست الایزای طراحی شده در مقایسه با نتایج کیت ایدکس به ترتیب ‮‭59‬ و ‮‭82‬ درصد مشخص گردید. نتایج نشان می دهد این سیستم طراحی شده با حساسیت بالا می تواند به عنوان یک تست قربالگری سریع مورد استفاده قرار گیرد.