بررسی تهیه آزمایشگاهی واکسن علیه ‭E. coli K99 ‬از سویه های بومی جدا شده در استان فارس

اسهال در نشخوارکنندگان نوزاد معمولا با بیماری روده کوچک مرتبط است و توسط ترشح زیاد یا عدم جذب ایجاد می شود. اشریشیاکلی K‮‭99‬انتروتوکسیژن ، انتروتوکسین مقاوم به حرارت ‭STa ‬تولید میصکند که پس از چسبسدن باکتری به مخاط روده از طریق فیمبری بیماری های اسهالی ایجاد می کند. بدلیل مقاومتهای آنتی بیوتیکی، استفاده از واکسن جهت پیشگیری از بیماری بسیار کارآمد است. از گوساله های 1 تا 7 روزه مبتلا به اسهال در مزارع مختلف استان فارس نمونه سوآب گرفته شد. سوآب ها بر روی محیط آگار خوندار و مک کانگی کشت شد. کلونی های مشکوک جهت شناسایی به روش رنگ آمیزی گرم وتست های بیوشیمیایی مورد ارزیابی قرار گرفت. به منظور تایید سویه ها تستهای آنتی سرمی نیز انجام شد. تستهای تکمیلی ‭PCR ‬نیز جهت شناسایی فاکتورهای حدت باکتری مورد بررسی قرار گرفت. از کشت ‮‭24‬ ساعته باکتری در محیط اختصاصی مینکا جهت تعیین دز کشندگی در بچه موش استفاده شد. همین تست در حیوان هدف گوساله نیز تکرار گردید. پس از انجام تستهای کنترلی ، باکتری در محیط مینکا تحت هوادهی در شیکر کشت شد. سپس باکتری کشت داه شده غیرفعال و تست استریلیتی انجام گرفت. فرمولاسیون ادجوانت نیز طبق پروتکل استاندارد تکمیل گردید. آزمایش بی ضرری در حیوان آزمایشگاهی و هدف انجام شد. سپس آزمایشهای ایمن سازی در حیوان آزمایشگاهی موش و گاوهای آبستن بترتیب طبق برنامه زمانی مشخص انجام گرفت. خونگیری و انجام تست الیزا از مراحل بعدی کار بود، اما قبل از آن تست الیزا استاندارد شد. نتایج افزایش تیتر ایمنی از هفته سوم تا انتهای هفته چهارم در حیوان آزمایشگاهی و همچنین افزایش این تیتر از هفته چهارم تا هشتم در حیوان هدف نشان داد. آزمایش واکسن آزمایشی در مقیاس بزرگتر در فیلد نیز مورد بررسی قرار گرفت و نتایج بسیار خوبی داشت. کلید واژه: واکسن ‭E. coli K‬‮‭99‬ سویه های بومی استان فارس