شفاف سازی ویروسی تب برفکی غیر فعال تهیه شده در فرمانتور با استفاده از فیلتر سارتوکلیر جهت تهیه واکسن

ویروس تب برفکی ‭Foot and Mouth Disease (FMD) ‬متعلق به خانواده پیکورنا ویریده و از جنس آفتو ویروس می باشد بروز بیماری تب برفکی در حیوانات اهلی مانند گاو وگوسفند و بز و غیره باعث صدمه اقتصادی مهمی می شود. بنابراین جهت جلو گیری از شیوع و بروز یا اپیدمی بیماری باید شرایطی جهت کنترل و پیشگیری آن در نظر داشته باشیم، در مناطقی که بیماری تب برفکی بصورت آندمیک باشد تلقیح واکسن بهترین روش کنترل و پیشگیری از بیماری محسوب می شود. در بخش تحقیق و تولید واکسن تب برفکی موسسه سرم سازی رازی از کشت سوسپانسیون سلول ‮‭21‬‭-BHK ‬جهت تولید واکسن استفاده می شود.در پروسه تولید واکسن تب برفکی در حجم زیاد بدلیل کشت سوسپانسیون سلول ‮‭21‬‭-BHK ‬در فرمانتور در اثر رشد و تزاید ویروس در سلول ، سلولهامتلاشی شده و در هنگام برداشت ویروس مقدار زیادی لاشه هاو اضافات سلولی نیز همراه ویروس جمع آوری می شود. وجود این لاشه ها باعث ایجاد ظاهری غیر شفاف در ویروس تولید شده می شوند،جهت حذف این اضافات سلولی بایداز سانتریفوژ ‭continuous ‬یا فیلتر استفاده نمود که بدلیل هزینه بسیار زیاد سانتریفوژ و نیز در دسترس نبودن این نوع دستگاهها فیلتراسیون بهترین و مطمین ترین راه جهت شفاف سازی ویروس می باشد. در این بررسی از فیلتر سارتوکلیر ‭sartoclear deep filter ‬با اندازه منافذ 1 ‭um‬و 4 ‭um‬و 8 ‭um ‬و استفاده گردید. شفاف سازی ویروس تب برفکی علاوه بر اینکه با حذف اضافات سلولی باعث ایجاد ظاهری صاف و شفاف و عاری از رسوب می شود باعث حذف پروتیینهای سلولی شده تا سایتهای جذب ویروس روی ژل هیدروکسید آلومینیوم اشغال نشوند و جذب ویروس روی ژل بیشتر شودو افزایش جذب ویروس روی ژل هیدروکسید آلومینیوم باعث افزایش کارایی واکسن می شود. از دیگر مزایای این روش باعث غیر فعال شدن بهتر ویروس تب برفکی جهت ساخت واکسن می شودو همچنین باعث تحریک بهتر سیستم ایمنی در بدن دام شده و از طرفی باعث کاهش آثار شوک زایی ناشی از پروتیین های سلولی می شود ، حذف کلروفرم از پروسه تولید و امکان کنسانتره یا تغلیظ ویروس از دیگر مزایای این طرح می باشد.در این بررسی بایداز سانتریفوژ ‭continuous ‬یا فیلتر استفاده نمود که بدلیل هزینه بسیار زیاد سانتریفوژ و نیز در دسترس نبودن این نوع دستگاهها فیلتراسیون بهترین و مطمین ترین راه جهت شفاف سازی ویروس می باشدکه با توجه به نتایج آزمایشات اندازه گیری میزان ‮‭140‬‭S Sucrose density gradient (SDG) ‬، تعیین عیار ویروس زنده ‭(%TCID‬‮‭50‬ ) ،اندازه گیری ‭CFU‬،آزمایش الایزا ‭( ELISA)‬و آزمایش ‭national turbidity unit (NTU) ‬، روش فیلتراسیون با فیلتر ‭sartoclear ‬با 4 ‭pore size ‬میکرون می تواند جایگزین مناسبی برای سانتریفوژ مدام باشد که در بخش تب برفکی این امر محقق شده وبا توجه به هزینه ها و عدم دسترسی به سانتریفوژ، استفاده از این سیستم فیلتراسیون بصورت روتین و با کیفیت خوب دنبال می شود.