کلون و بیان قطعه ‭S1 ‬پرتوسیس توکسین در باکتری ‭E.coli ‬و ارزیابی ایمنی زایی آن در مدل موشی.

بردتلا پرتوسیس باکتری گرم منفی و عامل بیماری سیاه سرفه در دستگاه تنفسی انسان است . پرتوسیس توکسین مهمترین آنتی ژن این باکتری در ایجاد پاتوژنیسیته و ایجاد محافظت بوده و زیر واحد S1 مهمترین زیرواحد این توکسین است. در این مطالعه برای بیان مهمترین زیر واحد پرتوسیس توکسین، پس از تکثیر ژن S1، وکتور های بیانی ‭pAED‬4 ‭pET- ‬‮‭22‬‭b(+)‬، ‭pET-‬‮‭28‬a، ‭pET-‬‮‭14‬b، حاوی ژن S1 به باکتری اشرشیا کلی ‭(DE‬3‭) BL‬‮‭21‬ و ‭(plys s) BL‬‮‭21‬ (به عنوان میزبان بیانی) ترانسفورم گردید تا ‭rS‬1 بیان گردد. بهترین نتیجه در وکتور ‭pET- ‬‮‭22‬‭b(+) ‬و میزبان ‭(DE‬3‭) BL‬‮‭21‬ بدست آمد. پروتیین بیان شده توسط وسترن بلات کنترل گردید. نتایج نشان دهنده آن است که پروتیین بیان شده‮‭31‬ و ‮‭28‬ کیلو دالتونی همان پروتیین S1 همراه و یا بدون قطعه ‭leader peptide ‬می باشد. تزریق زیر جلدی ‭rS‬1 به همراه ادجوانت فروند به عنوان و همچنین گروههای کنترل) ادجوانت و واکسن سلولار ساخت موسسه رازی) به موشها باعث تولید آنتی بادی های ‭IgG ‬کل و ‭IgG‬2‭a ‬و همینطور افزایش ‭IFN- ‬شد که نشان گر فعالیت بیشتر سلولهای وابسته به ‭Th‬1 و سیستم ایمنی سلولی بود.مثبت بودن وسترن بلات و افزایش تیتر آنتی بادی ‭IgG ‬کل نشان دهنده ایمونوژن بودن ‭rS‬1 است. ارزیابی توانمندی گروه های موشی تزریق شده به روش کندریک نشان دهنده این بود که ‭rS‬1 دارای قدرت محافظت کنندگی نیست ونیاز به همراهی آنتی ژنهای دیگر پرتوسیس دارد. نتایج این مطالعه نشان داد که می توان پروتیین ‭rS‬1 را به صورت تنها به عنوان آنتی ژن در کیت های تشخیصی (مانند الایزا) و یا به صورت ترکیبی به همراه ادجوانت مناسب و آنتی ژنهای دیگر مثل ‭FHA FIM‬، ‭ACT ‬، ‭PRN ‬در واکسن آسلولار ضد پرتوسیس استفاده کرد. کلمات کلیدی: پرتوسیس توکسین، پروتیین ،S1 ارزیابی ایمنی