شبیه سازی مولکولی و بیان ژن هورمون رشد ماهی کپور ایران

هورمون رشد باعث تحریک و تکثیر سلول ها در انسان و حیوانات می شود. این هورمون یک پلی پپتید تک زنجیره ای است که وزن مولکولی در حدود ‮‭22‬ کیلو دالتون دارد و دارای تعداد تقریبی ‮‭191‬ اسید آمینه است که در سلول های سوماتوتروف واقع در بال جنبی غده هیپوفیز پیشین ساخته شده و ترشح می گردد. هدف از انجام پروژه حاضر شبیه سازی ژن هورمون رشد ماهی قرمز به عنوان یک نمونه قابل دسترس از ماهیان است تا پس از کلونینگ صحیح این ژن بتوان در تحقیقات بعدی بیان آن را در یک سیستم بیان یوکاریوتی بررسی نموده و متعاقب آن اثرات آن را در میزان رشد این نمونه از ماهیان در طول دور تکثیرشان مطالعه کرد. در این پروژه پس از جداسازی هیپوفیز ماهی، استخراج ‭RNA ‬کل از آن انجام گرفته و پس از اطمینان از سلامت ‭RNA ‬های استخراج شده با استفاده از ژل الکتروفورزی، از ‭mRNA ‬مربوطه، با استفاده از آنزیم ترانس کریپتاز معکوس ، ‭cDNA ‬ساخته شد. سپس با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر و ناحی کد کنند ژن مزبور جداسازی گردید. قطعه حامل ناحی کد کننده در وکتور کلونینگ پلاسمیدی قرار گرفته و از طریق ترانسفورماسیون شیمیایی، ‭DNA ‬نوترکیب به داخل یک سلول میزبان باکتریایی انتقال یافت. نتایج مقدماتی ما نشان دهند بیان آنالتیک ژن هورمون رشد ماهی قرمز در سلول میزبان کلونینگ است. کلمات کلیدی: شبیه سازی، هورمون رشد، وکتور کلونینگ، نسخه برداری معکوس