ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

بهینه سازی بیان و تخلیص آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری هالوترموتولرانت Bacillus licheniformis SL-1

محل انتشار: مجله تازه های بیوتکنولوژی سلولی – مولکولی، دوره: 9، شماره: 34
سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 347

فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:
https://civilica.com/doc/1162458

شناسه ملی سند علمی:

JR_NCMBJ-9-34_002

تاریخ نمایه سازی: 16 اسفند 1399

چکیده مقاله:

سابقه و هدف: آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز (EC 3.4.21.19) متعلق­به خانواده‌ سرین پروتئازها است. این آنزیم می­تواند با هیدرولیز اختصاصی پیوندهای پپتیدی در آنالیز ساختار پروتئین، سنتز پپتیدها به روش فاز جامد و تهیه نانوتیوب­ها مورد استفاده قرار گیرد. هدف از این مطالعه تولید آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز باکتری Bacillus licheniformis SL-1 مقاوم­به حرارت که بومی ایران است است. مواد و روش­ها: در این مطالعه بیان آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز از باکتری Bacillus licheniformis SL-1 در E. coli BL21 i به­صورت پری­پلاسمی در دماهای ۱۶، ۲۰ و ۳۷ درجه سانتی­گراد و غلظت­های 4/0، ۱ و ۲ میلی­مولار القاگر بهینه سازی شد. با توجه­به این­که آنزیم نوترکیب تولید شده دارای دنباله هیستیدینی (His-tag) است از ستون نیکل سفارز برای تخلیص به روش کروماتوگرافی تمایلی استفاده گردید. یافته­ ها: شرایط مختلف برای بیان آنزیم نوترکیب گلوتامات اندوپپتیداز بررسی گردید و بهترین نتایج برای بیان پری پلاسمیک و محلول آنزیم در میزبان E. coli BL21 در دمای ۳۷ درجه سانتی­گراد با غلظت ۲ میلی­مولار IPTG به­دست آمد. نتیجه­ گیری: بررسی کیفی نتایج حاصل از بیان آنزیم تحت شرایط مختلف حاکی از آن­ست­که بیان پروتئین نوترکیب وابسته­به دما بوده و نیازمند غلظت­های بالای القاگرIPTG  است. مطالعه حاضر نتایج اولیه بررسی امکان تولید نوترکیب آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز در سیستم بیانی E. coli BL21 است. برای تولید هر چه بهتر آنزیم گلوتامات اندوپپتیداز سایر پارامترهای مؤثر مانند سیستم­های بیانی و روش­های تخلیص جایگزین قابل بررسی و بهینه سازی است.   

کلیدواژه ها:

Glutamate-specific endopeptidase ، Periplasmic expression ، Halo-thermo tolerant B. licheniformis SL-1 ، گلوتامات اندوپپتیداز ، بیان پری پلاسمی ، باکتری B. licheniformis SL-1

نویسندگان

صبا بابکان

Department of Technical and Engineering ۲, Islamic Azad University of Tabriz, Tabriz, Iran

اعظم صفری

Biotechnology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.

رضوان منیری

Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Medicine, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran

مریم حمزه میوه رود

School of Pharmacy, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.

سیاوش دستمالچی

School of Pharmacy, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Alexandra J, Barbosa R, Saldanha JW, Garratt RC, Novel features ...
  • Birktoft JJ, Breddam K. Glutamyl endopeptidases. In: Methods Enzymol, 1994. ...
  • Bressollier P, Letourneau F, Urdaci M, Verneuil B, Purification and ...
  • Chen H, Xu Z, Xu N, Cen P, Efficient production ...
  • Fleischmann RD, Adams MD, White O, Clayton RA, Kirkness EF, ...
  • Fraser CM, Gocayne JD, White O, Adams MD, Clayton RA, ...
  • García-Junceda E, Lavandera I, Rother D, Schrittwieser JH, (Chemo) enzymatic ...
  • Graveland-Bikker JF, Ipsen R, Otte J, de Kruif CG, Influence ...
  • Ipsen R, Otte J, Self-assembly of partially hydrolysed α-lactalbumin. Biotechnol. ...
  • Kakudo S, Kikuchi N, Kitadokoro K, Fujiwara T, Nakamura E, ...
  • Kakudo S, Yoshikawa K, Tamaki M, Nakamura E, Teraoka H, ...
  • Kawalec M, Potempa J, Moon JL, Travis J, Murray BE, ...
  • Kitadokoro K, Nakamura E, Tamaki M, Horii T, Okamoto H, ...
  • Kou G, Shi S, Wang H, Tan M, Xue J, ...
  • Lozano P, De Diego T, Carrié D, Vaultier M, Iborra ...
  • Milgotina E, Shcheglov A, Lapa G, Chestukhina G, Voyushina TL, ...
  • Ohara-Nemoto Y, Ikeda Y, Kobayashi M, Sasaki M, Tajika S, ...
  • Phuah E-T, Lai O-M, Choong TS-Y, Tan C-P, Lo S-K, ...
  • Prabakaran S, Tepp W, DasGupta B. Botulinum neurotoxin types B ...
  • Rebrikov DV, Akimkina TV, Shevelev AB, Demidyuk IV, Bushueva AM, ...
  • Safary A, Moniri R, Mirhashemi SM, Nikzad H, Khiavi MA, ...
  • Sharma R, Sharma PR, Choudhary ML, Pande A, Khatri GS, ...
  • Sloma A, Rudolph C, Rufo G, Sullivan B, Theriault K, ...
  • Wehofsky N, Wissmann J-D, Alisch M, Bordusa F, Engineering of ...
  • Ye W, Liu J, Wang H, Wang J, Wang X, ...
  • Ye W, Liu T, Zhang W, Tan G, Sun Z, ...
  • Yokoi K-j, Kakikawa M, Kimoto H, Watanabe K, Yasukawa H, ...
  • Yoshikawa K, Tsuzuki H, Fujiwara T, Nakamura E, Iwamoto H, ...
  • Alexandra J, Barbosa R, Saldanha JW, Garratt RC, Novel features ...
  • Birktoft JJ, Breddam K. Glutamyl endopeptidases. In: Methods Enzymol, 1994. ...
  • Bressollier P, Letourneau F, Urdaci M, Verneuil B, Purification and ...
  • Chen H, Xu Z, Xu N, Cen P, Efficient production ...
  • Fleischmann RD, Adams MD, White O, Clayton RA, Kirkness EF, ...
  • Fraser CM, Gocayne JD, White O, Adams MD, Clayton RA, ...
  • García-Junceda E, Lavandera I, Rother D, Schrittwieser JH, (Chemo) enzymatic ...
  • Graveland-Bikker JF, Ipsen R, Otte J, de Kruif CG, Influence ...
  • Ipsen R, Otte J, Self-assembly of partially hydrolysed α-lactalbumin. Biotechnol. ...
  • Kakudo S, Kikuchi N, Kitadokoro K, Fujiwara T, Nakamura E, ...
  • Kakudo S, Yoshikawa K, Tamaki M, Nakamura E, Teraoka H, ...
  • Kawalec M, Potempa J, Moon JL, Travis J, Murray BE, ...
  • Kitadokoro K, Nakamura E, Tamaki M, Horii T, Okamoto H, ...
  • Kou G, Shi S, Wang H, Tan M, Xue J, ...
  • Lozano P, De Diego T, Carrié D, Vaultier M, Iborra ...
  • Milgotina E, Shcheglov A, Lapa G, Chestukhina G, Voyushina TL, ...
  • Ohara-Nemoto Y, Ikeda Y, Kobayashi M, Sasaki M, Tajika S, ...
  • Phuah E-T, Lai O-M, Choong TS-Y, Tan C-P, Lo S-K, ...
  • Prabakaran S, Tepp W, DasGupta B. Botulinum neurotoxin types B ...
  • Rebrikov DV, Akimkina TV, Shevelev AB, Demidyuk IV, Bushueva AM, ...
  • Safary A, Moniri R, Mirhashemi SM, Nikzad H, Khiavi MA, ...
  • Sharma R, Sharma PR, Choudhary ML, Pande A, Khatri GS, ...
  • Sloma A, Rudolph C, Rufo G, Sullivan B, Theriault K, ...
  • Wehofsky N, Wissmann J-D, Alisch M, Bordusa F, Engineering of ...
  • Ye W, Liu J, Wang H, Wang J, Wang X, ...
  • Ye W, Liu T, Zhang W, Tan G, Sun Z, ...
  • Yokoi K-j, Kakikawa M, Kimoto H, Watanabe K, Yasukawa H, ...
  • Yoshikawa K, Tsuzuki H, Fujiwara T, Nakamura E, Iwamoto H, ...
    • نمایش کامل مراجع