مطالعه ژنومی آنزیم پولولاناز از باسیلوس های گرمادوست و همسانه سازی آن در باکتری اشرشیا کولی با روش SDS PAGE

زمینه و هدف : باسیلوس ، باکتری گرم مثبت و هوازی است که از خاک ،آب ، رسوبات و منابع مختلف جدا می شوند . این باکتری ها به دلیل توانایی منحصر به فرد خود در تولید متابولیت های ثانویه و بسیاری ازآنزیم های کاربردی در صنعت حائز اهمیت تلقی می شوند. یکی از هدف های این پژوهش جداسازی ژنومی ژن پولولاناز از باسیلوس های گرمادوست و کلونینگ آن در باکتری اشرشیاکلی اوراگامی با روش sds page به منظور استفاده در مصارف دارویی و صنعتی بود.نتایج : از غربالگری نمونه های خاک ارسالی به آزمایشگاه که براساس خصوصیات مورفولوژیک ، میکروسکوپی و تست های بیوشیمیایی تعیین هویت شدند در مجموع ۱۲ ایزوله باسیلوس جداسازی شدکه از این تعداد ۳ ایزوله (۲۵%) دارای ژن پولولاناز بودند. پس از کلون کردن ژن های پولولان از توسط کلنی سلکشن (آبی/سفید) سویه های کلون شده جداسازی شدند . آزمون Real timePCR و در نهایت سکانسینگ محصول PCR میزان بیان ژن pul در باکتری اشریشیاکلی اوراگامی را تایید کردند .