آنالیز بیان ژن های GFRa۱ و ZBTB۱۶ در سلول های بنیادی اسپرم ساز موش

سلول های بنیادی اسپرم ساز، بنیانگذار اسپرماتوژنز، به عنوان مهم ترین پروسه سیستم تولیدمثلی در پستانداران مذکر هستند و تنهاسلول های بنیادی در بدن به شمار می آیند که می توانند از طریق گامت زایی اطلاعات ژنتیکی را به نسل بعدی منتقل کنند؛هدف از پروژه حاضر، بررسی ماهیت پرتوانی سلول های بنیادی اسپرم ساز در شرایط in vitro ، in vivo و آنالیز بیان مارکرهای سطحسلولی است. سلول های اسپرم ساز از بیضه موش با استفاده از روش هضم آنزیمی استخراج شده و در محیط حاوی FGF ، EGF وGDNF و لایه تغذیه کننده STO کشت داده شدند. سپس برای بررسی ایمنوسیتوشیمیایی، ایمنوهیستوشیمیایی و RT-PCR کلونیهای حاصله از مارکرهای ZBTB۱۶ و GFRa۱ استفاده شد. ماهیت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی حاصله پس از جداسازی وکشت، به وسیله معیار هایی نظیر رشد خوشه ای کلنی ها در محیط کشت، بیان مارکر ZBTB۱۶ در سلول های بنیادی جنینی،سلول های موجود در لوله اسپرم ساز موش با استفاده از روش RT-PCR را نشان داد. بعلاوه، بررسی ایمنوهیستوشیمیایی وایمنوسیتوشیمایی بیان مارکر GFRa۱ در بیضه موش، دو نوع شکل از بیان را در گروه های مختلف سلول های لوله اسپرم ساز نشانداد. همچنین، بیان مثبت این مارکر در سلول های بنیادی اسپرم ساز بیضه موش در مقایسه با عدم بیان این مارکر در سایر سلول هایحاضر در لوله اسپرم ساز موش در بررسی Fluidigm Real-time PCR دریافت شد. با توجه به ضرورت شناخت هرچه بیشتر سلولهای بنیادی اسپرم ساز برای دستیابی به روش های هرچه مفید تر در درمان ناباروری، که به عنوان یک مساله جهانی مطرح است،یافته های پژوهش حاضر در ارزیابی بیان مارکر های GFRa۱ و ZBTB۱۶ در لوله اسپرم ساز و در نتیجه، شناخت بیشتر ویژگی هایسیتولوژیک سلول های بنیادی اسپرم ساز حاصل شد به طوریکه یافته های حاصل می تواند در تحقیقات پیشرفته حوزه بیولوژی تولیدمثل مفید باشد.