ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی به کاپرئومایسین با استفاده از روش هایMultiplex PCR و Real-Time PCR

مقدمه و هدف: کاپرومایسین، یک داروی مهم برای درمان سل مقاوم به چند دارو و یک آنتی بیوتیک پپتیدی ماکروسیکلیک است که توسط Saccharothrix mutabolis زیر گونه capreolus تولید می شود. هدف از این مطالعه ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی به کاپرئومایسین با استفاده از روش های Multiplex PCR و Real-Time PCR می باشد.مواد و روش کار: اساس مقاومت به این دارو با جداسازی و شناسایی سویه های مقاوم به کاپرومایسین در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس و یک مایکوباکتریوم غیرسلی بررسی شد. اطلاعات لازم در مورد مقاوم به کاپرومایسین از یک کتابخانه ژنی مربوط به مایکوباکتریوم غیرسلی که در این مطالعه M. smegmatis می باشد بازیابی شدند. همچنین محل ایجاد ترانسپوزون جهش یافته در ژن tlyA (Rv۱۶۹۴) مربوط به ژنوم M. tuberculosis H۳۷Rv بررسی و انتخاب شد. DNA های ژنومی از منابع جهش یافته ترانسپوزون M. tuberculosis H۳۷Rv با استفاده از پرایمرهای ژن tlyA و ترانسپوزون برای شناسایی جهشها در ژن هایtlyA توسط Multiplex PCR و Real-Time PCR غربالگری شدند.نتایج: یک جهش مقاوم به کاپرومایسین که حاوی ژن tlyA بود، شناسایی شد. ژن tlyA نوع وحشی حساسیت به کاپرومایسین را در جهشهای ترانسپوزون M. smegmatis و M. tuberculosis ترمیم کرد. در ژن tlyA ، ۲۸ جهش خودبهخود مقاوم به کاپرومایسین تولید شده از سه سویه مختلف M. tuberculosis و جدایه های بالینی مقاوم به کاپرومایسین یافت شد .نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده، به نظر می رسد tlyA بر ریبوزوم تاثیر می گذارد، و جهش tlyA باعث ایجاد مقاومت به کاپرومایسین می شود.