بررسی بیان ژن lnT هلیکوباکتر پیلوری در سلول های HDF انسان به روش RT-PCR
سال انتشار: 1396
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 68
فایل این مقاله در 12 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_RUMS-16-9_002
تاریخ نمایه سازی: 11 مرداد 1402
چکیده مقاله:
چکیده
زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری، باکتری مارپیچی شکل و گرم منفی است که موجب بیماریهای معده و دوازدهه در انسان میشود. به دلیل وجود ایراداتی در درمانهای آنتیبیوتیکی، تلاشهای رو به افزایشی در جهت تولید واکسن موثر برای این عفونت صورت گرفته است. هدف از این تحقیق، ساخت سازواره ژنی حامل قطعه ژن lnT و بررسی بیان آن در سلولهای انسانی به روش RT-PCR است.
مواد و روش ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، ژن lnT از ژنوم هلیکوباکتر پیلوری به روش واکنش زنجیرهای پلیمراز (Polymerase Chain Reaction) جدا شد. همسانه سازی محصولات PCR به روش کلون سازی T/A در وکتور T مناسب، انجام شد. سپس ژن lnT در وکتور بیانی یوکاریوتی pEGFP-C۲ سابکلون گردید. جهت بررسی بیان ژن lnT، سازواره pEGFP-C۲-lnT به روش الکتروپوریشن به سلولهای فیبروبلاست پوست انسان منتقل و بیان آن به روش RT-PCR بررسی شد.
یافتهها: انجام PCR منجر به تکثیر قطعه ۱۲۹۰ جفت بازی مربوط به ژن lnT گردید. این ژن با موفقیت در وکتور pTZ همسانه سازی شد و نتایج هضم آنزیمی و تعیین توالی نشان داد ژن lnT در وکتور بیانی سابکلون گردیده و سازواره نهایی pEGFP-C۲-lnT ایجاد شده است. بررسی بیان این ژن به روش RT-PCR، تشکیل باند اختصاصی این ژن را نشان داد.
نتیجهگیری: ژن lnT همسانه سازی شده در وکتور بیانی یوکاریوتی pEGFP-C۲، توان تولید محصول اختصاصی این ژن در سلولهای یوکاریوتی را دارد. لذا بهنظر می رسد این سازواره ژنی، از پتانسیل لازم برای بررسی ایمنیزایی در مدل حیوانی به عنوان واکسن ژنی علیه هلیکوباکتر پیلوری برخوردار باشد.
واژه های کلیدی: هلیکوباکتر پیلوری،کلونینگ، ژن lnT، RT-PCR
کلیدواژه ها:
نویسندگان
راضیه رحمانی پیانی
Department of Biology, Faculty of Basic Science, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
عباس دوستی
Biotechnology Research Center, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :