تعیین جهش در اگزونهای شماره ۵ و ۸ ژن ۵۳ P در مبتلایان به سرطان پستان فامیلی با روش غیر رادیواکتیو PCR-SSCP

زمینه و هدف :  سرطان پستان شایعترین سرطان زنان در دنیا می باشد و تغییرات ژنتیکی متنوعی را می توان در آن مشاهده کرد یکی از شایعترین این تغییرات جهش در ژن    ۵۳ P  است . این ژن یکی از مهمترین مهارکننده های تومور می باشد و پروتئین مزبور ( ۵۳ P ) در بسیاری از اعمال سلول نقش دارد. این ژن شامل ۱۱ اگزون است که اگزون های چهارگانه ۵ تا ۸ نواحی مرکزی پروتئین که عملکرد  ۵۳ P  را بعهده دارد راکد می کنند لذا جهش های این اگزونها از اهمیت بیشتری برخوردار بوده و باعث غیرفعال شدن یا سوء عملکرد این پروتئین می گردند.  تعیین جهش های این ژن کمک بزرگی در شناخت مکانیسم ژنتیکی شروع و پیشرفت سرطان پستان و در نتیجه تشخیص و درمان به موقع این سرطان می باشد. که هدف این مطالعه نیز تعیین جهش های  ۵۳ P در دو اگزون شماره ۵ و ۸ این ژن بوده است .  مواد و روش ها:  در این مطالعه ۳۲ بیمار مبتلا به سرطان پستان فامیلی که تحت عمل بیوپسی پستان قرار گرفته بودند مورد بررسی قرار گرفت .  استخراج   DNA  با روش فنل - کلروفرم ، انجام و پس از تعیین درجه خلوص با روش اسپکتروفتومتری ، جهت تکثیر اگزونهای شماره ۵ و ۸ از روش   (polymerase chain reaction) PCR  استفاده گردید، با روش   SSCP ،  (single strand conformation polymorphism)  که روش معمول تعیین جهش برای ژن   ۵۳ P  می باشد محصولات تک رشته ای   (Single strand)  اگزونهای مزبور در ژل پلی اکریل آمید الکتروفورز و توسط روش نیترات نقره رنگ آمیزی گردید نهایتا تغییرات حرکتی باندهای حاصله با نمونه کنترل (طبیعی ) مقایسه و مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت .  یافته ها:  پس از آنالیز ژلهای   SSCP  و مقایسه حرکت باندهای حاصله در ژل با نمونه کنترل ، در اگزون شماره ۵ دو مورد و در اگزون شماره ۸ چهار مورد جهش تعیین گردید.  نتیجه گیری :  در این مطالعه به علت محدود بودن تعداد بیماران و محدودیت زمان انجام تحقیق تنها جهش های ژن ۵۳ P  در دو اگزون شماره ۵ و ۸ بیماران مبتلا به سرطان پستان فامیلی بررسی شد لذا پیشنهاد می گردد، این جهش ها در دیگر اگزونها و در مقیاس بزرگتر بررسی گردد تا اولا کدونهائی که بیشترین درصد جهش را دارا هستند شناسایی شوند و ثانیا ارتباط این جهش ها و مراحل مختلف سرطان پستان و به دنبال آن استفاده کلینیکی نتایج حاصل گردد.  واژه های کلیدی :  سرطان پستان ، جهش ، ژن   ۵۳ P ،  PCR-SSCP