جداسازی و بررسی خصوصیات مولکول هایscFv ضد HER۲ با استفاده از تکنولوژی نمایش فاژی جهت تشخیص سرطان پستان

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 98

فایل این مقاله در 19 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_IJOGI-17-92_003

تاریخ نمایه سازی: 28 مرداد 1402

چکیده مقاله:

مقدمه: scFv ها، فرم هایی از آنتی بادی های نوترکیب می باشند که با استفاده از روش های پیشرفته بیولوژی مولکولی و مهندسی ژنتیک ساخته می شوند. همچنین آنتی ژن HER۲ هدف مناسبی برای طیف گسترده ای از سرطان ها می باشد. مطالعه حاضر با هدف جداسازی scFv آنتی بادی های اختصاصی انجام شد. روش کار: به منظور جداسازی قطعات scFv های اختصاصی علیه قسمت خارج سلولی HER۲ کوت شده در ایمونوتیوب، تکنولوژی نمایش فاژی با استفاده از کتابخانه فاژی صورت گرفت. scFv آنتی بادی های به دست آمده در سویه TG۱ از باکتری اشرشیاکلی بیان شدند. محصولات نوترکیب با استفاده از ستون های کروماتوگرافی تمایلی بر علیه His-tag خالص سازی شدند. خصوصیات اتصالی قطعات scFv به دست آمده علیه آنتی ژن HER۲ با استفاده از آزمون های وسترن بلات، بیوسنسوری و فلوسایتومتری بررسی شدند. یافته ها: پس از سه مرحله گزینش علیه آنتی ژن HER۲، سه کلون scFv به دست آمد که نتایج توالی یابی DNA اختصاصیت آنها را تایید نمود. نتایج بررسی کنتیکی بیوسنسور نشان داد که همه scFv آنتی بادی های جدا شده علیه قسمت خارج سلولی آنتی ژن HER۲ تمایل اتصال با اپی توپ های شناخته شده بر روی سطح آنتی ژن را در دامنه مایکرومولار تا نانومولار دارند. نتایج وسترن بلات و فلوسایتومتری نیز اختصاصیت میل اتصال scFv ها با آنتی ژن HER۲ را اثبات کردند. نتیجه گیری: تکنیک نمایش فاژی یک ابزار قدرتمند برای جداسازی scFv آنتی بادی های متصل شونده اختصاصی با گیرنده HER۲ است که به عنوان آنتی ژن سطحی سرطان پستان شناخته می شود.

نویسندگان

شاهرخ قوتی

دانشجوی دکترای تخصصی ژنتیک، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، گروه انکولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات سرطان فاکس چیس، فیلادلفیا، پنسیلوانیا، ایالات متحده آمریکا.

مجتبی طهمورث پور

استاد گروه ژنتیک، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.

محمد رضا نصیری

دانشیار گروه ژنتیک، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.

احمد رضا بهرامی

دانشیار گروه زیست شناسی سلولی مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.

حسام دهقانی

دانشیار گروه فیزیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فرودوسی مشهد، مشهد، ایران. محقق، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.

حسین برقائی

دانشیار گروه انکولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات سرطان فاکس چیس، فیلادلفیا، پنسیلوانیا، ایالات متحده آمریکا.

گرگوری آدامز

استاد گروه انکولوژی پزشکی، مرکز تحقیقات سرطان فاکس چیس، فیلادلفیا، پنسیلوانیا، ایالات متحده آمریکا.

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Adams GP, Weiner LM. Monoclonal antibody therapy of cancer. Nat ...
  • Arteaga CL. ERBB receptors in cancer: signaling from the inside. ...
  • Yarden Y, Sliwkowski MX. Untangling the ErbB signalling network. Nat ...
  • Gravalos C, Jimeno A. HER۲ in gastric cancer: a new ...
  • Olayioye MA, Neve RM, Lane HA, Hynes NE. The ErbB ...
  • Sevcikova K, Vertakova-Krakovska B, Spanik S. Neoadjuvant Treatment in Patients ...
  • Chang HW, Nguyen DD, Washington E, Walker ID, Holloway SA. ...
  • Marcus WD, Wang H, Lohr D, Sierks MR, Lindsay SM. ...
  • Rodriguez-Diaz J, Monedero V, Perez-Martinez G, Buesa J. Single-chain variable ...
  • Carter P, Smith L, Ryan M. Identification and validation of ...
  • Davis CG, Jia XC, Feng X, Haak-Frendscho M. Production of ...
  • Winter G, Griffiths AD, Hawkins RE, Hoogenboom HR. Making antibodies ...
  • Brockmann EC, Vehniainen M, Pettersson K. Use of high-capacity surface ...
  • Hock B, Seifert M, Kramer K. Engineering receptors and antibodies ...
  • Knappik A, Ge L, Honegger A, Pack P, Fischer M, ...
  • Maynard J, Georgiou G. Antibody engineering. Ann Rev Biomed Eng ...
  • Coomber DW. Panning of antibody phage-display libraries. Standard protocols. Methods ...
  • Romanov VI. Phage display selection and evaluation of cancer drug ...
  • Aina OH, Sroka TC, Chen ML, Lam KS. Therapeutic cancer ...
  • Schirrmann T, Meyer T, Schutte M, Frenzel A, Hust M. ...
  • Nissim A, Hoogenboom HR, Tomlinson IM, Flynn G, Midgley C, ...
  • Marks JD, Hoogenboom HR, Bonnert TP, McCafferty J, Griffiths AD, ...
  • Sambrook J, Russell DW. Molecular cloning: a laboratory manual. ۳rd ...
  • Krebber A, Bornhauser S, Burmester J, Honegger A, Willuda J, ...
  • Yuan QA, Simmons HH, Robinson MK, Russeva M, Marasco WA, ...
  • Martin AC. Accessing the Kabat antibody sequence database by computer. ...
  • Kabat EA, Wu TT. Identical V region amino acid sequences ...
  • Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation ...
  • Singh A, Poshtiban S, Evoy S. Recent advances in bacteriophage ...
  • Abdiche YN, Lindquist KC, Stone DM, Rajpal A, Pons J. ...
  • Bee C, Abdiche YN, Stone DM, Collier S, Lindquist KC, ...
  • Abdiche Y, Malashock D, Pinkerton A, Pons J. Determining kinetics ...
  • Bee C, Abdiche YN, Pons J, Rajpal A. Determining the ...
  • Geuijen CA, Clijsters-van der Horst M, Cox F, Rood PM, ...
  • Ladner RC, Sato AK, Gorzelany J, de Souza M. Phage ...
  • Thie H, Meyer T, Schirrmann T, Hust M, Dubel S. ...
  • Nelson AL, Reichert JM. Development trends for therapeutic antibody fragments. ...
  • Hirose M, Hayano T, Shirai H, Nakamura H, Kikuchi M. ...
  • Khan NA, Greenman J, Topping KP, Hough VC, Temple GS, ...
  • Vitaliti A, Wittmer M, Steiner R, Wyder L, Neri D, ...
  • Ayat H, Burrone OR, Sadghizadeh M, Jahanzad E, Rastgou N, ...
  • Schirrmann T, Al-Halabi L, Dubel S, Hust M. Production systems ...
  • O'Brien PM, Aitken R. Broadening the impact of antibody phage ...
  • Mergulhao FJ, Monteiro GA. Periplasmic targeting of recombinant proteins in ...
  • Ceran C, Cokol M, Cingoz S, Tasan I, Ozturk M, ...
  • نمایش کامل مراجع