تهیه و تخلیص آنتی بادی منوکلونال علیه آنتی ژن لیپوآرابینومان مانوزیله مایکوباکتریوم بویس

مقدمه و هدف: لیپوآرابینومان مانوزیله (ManLAM)­ از آنتی­ژن های گلیکولیپیدی است که درصد قابل توجهی از دیواره سلولی باکتری مایکوباکتریوم بویس ب ث ژ را تشکیل می دهد. نظر به اینکه تولید آنتی بادی منوکلونال آن، به­ویژه در طراحی کیت تشخیص سریع بیماری سل  کاربردهایی فراوان دارد، لذا هدف از تحقیق حاضر، تولید آنتی بادی منوکلونال ضد این آنتی­ژن می باشد.  مواد و روش کار: پس از تزریق های منظم موش های BALB/c با BCG سونیکیت­شده، آنتی ژن LAM­، تیتر آنتی بادی تولیدشده بررسی­گردید. لنفوسیت های طحالی موش­ها و سلول­های میلومای Sp۲/۰ با کمک پلی اتیلن گلیکول امتزاج­داده­شدند. سلول­ها در محیط HAT­ انتخاب­شدند و کلون های مولد آنتی بادی ضد آنتی ژن LAM با استفاده از آزمون الایزا­ شناسایی­شدند؛ پس از تخلیص آنتی­بادی منوکلونال، شناسایی آنتی­ژن­های لیپوآرابینومان مانوزیله و BCG سونیکیت­شده با روش وسترن بلاتینگ انجام­گرفت. نتایج: تعداد­۲ کلون H۲-۳B۹ , H۱-۳D۳ مولدآنتی بادی اختصاصی با جذب بالا در آزمایش الایزا، انتخاب­شدند. نتایج وسترن بلاتینگ، باند­۳۰ کیلو دالتونی مربوط به آنتی­ژن های لیپوآرابینومان مانوزیله و BCG سونیکیت­شده با استفاده از آنتی­بادی های منوکلونال IgM و IgG۳ را تاییدمی کرد. نتیجه­گیری: نتایج نشان­داد که امکان تولید و تخلیص آنتی­بادی منوکلونال با استفاده از امتزاج لنفوسیت های B طحال موش­های ایمن­شده و­ سلول­های میلوما وجودداشته، تایید واکنش اختصاصی آنتی­بادی مذکور قبل از انجام مطالعات  تشخیصی در شناسایی سریع سل در ادرار بیماران­ و بررسی های مصونیت­زایی واکسن ب ث ژ مورد توجه خواهدبود.