غنی سازی کتابخانه ژنی نانوبادی علیه پروتئین سطحی ویروس پاپیلومای انسانی عامل سرطان دهانه رحم

مقدمه و هدف: ویروس پاپیلومای انسانی، عامل اصلی سرطان دهانه رحم است و به­راحتی از فردی به فرد دیگر منتقل می­شود. برای جلوگیری از انتشار این ویروس، نیاز به تشخیص زود­هنگام و حساس سرطان دهانه رحم به­خوبی احساس می­شود. هدف از این مطالعه، غنی­سازی کتابخانه فاژی به­منظور جداسازی نانوبادی­های اختصاصی علیه پروتئین ۱L ویروس پاپیلومای انسانی است. از این نانوبادی­ها می­توان در کیت­های تشخیصی با حساسیت بالا برای سرطان دهانه رحم استفاده­کرد.مواد و روش­ها: تکثیر فاژهای حاوی کتابخانه نانوبادی در باکتری Escherichia coli انجام­شد و غنی­سازی کتابخانه به کمک روش نمایان­سازی فاژی صورت­گرفت. به­منظور اطمینان از غنی­سازی، تعداد فاژهای حاصل از هر مرحله شمرده شد و محصولات حاصل از هر مرحله غنی­سازی به کمک روش پلی کلونال فاژ الایزا مورد بررسی قرار­گرفتند؛ سپس بهترین کلون­ها از طریق روش مونوکلونال فاژ الایزا جداسازی شدند و با کمک تعیین توالی ژنی صحت آنها تایید­شد.یافته­ها: صحت فرایند غنی­سازی از طریق افزایش تعداد کلون­ها در خروجی غنی­سازی و افزایش اختلاف جذب نوری با کمک روش فاژ الایزا، در طول موج ۴۵۰ نانومتر به­اثبات­رسید و در انتها، ۴ کلون به عنوان بهترین کلون­ها انتخاب­شدند.نتیجه گیری: پس از سه مرحله غنی­سازی، کتابخانه فاژمیدی علیه پروتئین ۱L چهار سویه ویروس پاپیلومای انسانی غنی­سازی شد.