بیان پروتئین Omp۲۵ بروسلا آبورتوس در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس
سال انتشار: 1401
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 75
فایل این مقاله در 16 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-32-217_002
تاریخ نمایه سازی: 1 آبان 1402
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: در تمام گونه های باکتری بروسلا، توالی ژن Omp۲۵ حفاظت شده است. خاصیت آنتی ژنیسیته بالای محصول این ژن باعث تحریک سیستم ایمنی میزبان می شود. استفاده از باکتری پروبیوتیک مهندسی شده، روش مناسبی برای انتقال واکسن است. این مطالعه با هدف بیان Omp۲۵ باکتری بیماری زای بروسلا آبورتوس در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس، انجام پذیرفت.
مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، وکتور مورد نظر به همراه ژن و سیگنال پپتید (pNZ۸۱۴۸-Usp۴۵-Omp۲۵) طراحی و سنتز گردید. باکتری E. coli سویه TOP۱۰F با وکتور بیانی pNZ۸۱۴۸-Usp۴۵-Omp۲۵ مبتنی بر القا توسط نیسین ترانسفورم شد. با استفاده از کیت استخراج پلاسمید، از باکتری های ترانسفورم شده پلاسمید نوترکیب استخراج گردید. ترانسفورماسیون باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس با وکتور pNZ۸۱۴۸-Usp۴۵-Omp۲۵، توسط روش الکتروپوریشن انجام گرفت. بررسی بیان ژن Omp۲۵ در سطح RNA، به روش رونوشت برداری معکوس و تایید حضور پروتئین نوترکیب Omp۲۵ در باکتری مهندسی شده با روش SDS-PAGE، ارزیابی شد.
یافته ها: بیان موفقیت آمیز پروتئین Omp۲۵بروسلا آبورتوس در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس با RT-PCR تایید شد. با استفاده از روش سدیم دودسیل سولفات- پلی آکریل آمید ژل الکتروفورز (SDS-PAGE)، پروتئین ها براساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند .آنالیز بیان پروتئین ها، بیانOmp۲۵ را به صورت یک باند پروتئینی ۲۵ کیلو دالتونی اضافه در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ۸۱۴۸-Usp۴۵-Omp۲۵ در مقایسه با لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ۸۱۴۸ (وکتور فاقد ژن هدف) نشان داد.
استنتاج: مطالعه حاضر نشان داد که پروتئین Omp۲۵ در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده توسط الکتروپوریشن با وکتور نوترکیب pNZ۸۱۴۸-Usp۴۵-Omp۲۵ بیان می شود. باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده، می تواند در مطالعات آینده به عنوان واکسن زیر واحدی خوراکی جهت پیشگیری از بروسلوز، مناسب باشد.
کلیدواژه ها:
Brucella ، Omp۲۵ ، Lactococcus lactis ، probiotic ، electroporation ، بروسلا ، Omp۲۵ ، لاکتوکوکوس لاکتیس ، پروبیوتیک ، الکتروپوریشن
نویسندگان
سمیه تیربخش گوران
PhD Student in Molecular Genetics, Department of Biology, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
عباس دوستی
Associate Professor, Biotechnology Research Center, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
محمدسعید جامی
Assistant Professor, Cellular and Molecular Research Center, Basic Health Sciences Research Institute, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran . Department of Biology, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :