استفاده از روش Fast PCR جهت تشخیص گونه های فاسیولا

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 65

فایل این مقاله در 9 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_JMUMS-24-122_008

تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402

چکیده مقاله:

سابقه و هدف: انگل های شایع کبدی فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا از عوامل ایجادکننده فاسیولایازیس بوده، که بیماری جهانی و شایع در انسان و دام می باشد. در مطالعه حاضر ما یک روش سریع، آسان و در عین حال دقیق را با استفاده از متد PCR Fast جهت تشخیص افتراقی گونه های فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا معرفی نمودیم. مواد و روش ها: ۳۰ ایزوله فاسیولا ی بالغ از کبد گاو و گوسفند از کشتارگاه های استان مازندران جدا گردید. ناحیه ژنی ITS۱ با استفاده از پره میکس های Amp® Fast PCR، در مقایسه با یکی از پره میکس های متداول موجود در بازار (AccuPower® Taq PCR PreMix شرکت Bioneer) تکثیر شدند. به علاوه پروفایل PCR-RFLP جهت تشخیص افتراقی گونه های فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از آنزیم اندونوکلئازی TasI (Tsp۵۰۹I) انجام گرفت. یافته ها: باندی با وزن تقریبی ۴۶۳ جفت باز برای تمامی نمونه های فاسیولا با استفاده از پره میکس Sapphire Amp® Fast PCR فقط ظرف مدت ۳۴ دقیقه پس از تکثیر به دست آمد در حالی که تکثیر اسیدهای نوکلئیک با استفاده از پره میکس متداول پس از حدود ۱ ساعت و ۴۶ دقیقه کامل شد. تمامی محصولات با آنزیم محدودالاثر (Tsp۵۰۹I TasI) مورد هضم قرار گرفت. پس از هضم در فاسیولا هپاتیکا دو باند ۱۵۱ و ۳۱۲ جفت باز و در فاسیولا ژیگانتیکا سه باند ۹۳، ۱۵۱ و ۲۱۹ جفت باز تولید شد. استنتاج: واکنش Fast PCR با استفاده از پره میکس Sapphire Amp® در کم تر از ۳/۱ زمان استفاده از سایر پره میکس های رایج کامل می شود. روش جدید Fast PCR با استفاده از پره میکس. Sapphire Amp® Fast PCR یک متد آسان، سریع و در عین حال دقیق بوده که جهت تعیین و تشخیص افتراقی گونه های فاسیولادر مطالعات اپیدمیولوژیک در انسان و دام های اهلی در مناطق اندمیک فاسیولیازیس کاربرد دارد.

نویسندگان

آزاده میزانی

PhD Student in Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

پوریا گیل

Assistant Professor, Department of Physiology and Pharmacology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

شهاب الدین سروی

Assistant Professor, Department of Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Faculty of Medical Mycology and Parasitology, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

احمد دریانی

Professor, Department of Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Faculty of Medical Mycology and Parasitology, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

مهدی شریف

Professor, Department of Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Faculty of Medical Mycology and Parasitology, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

محمد تقی رحیمی

PhD Student in Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

آذر شکری

PhD Student in Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

احسان احمدپور

PhD Student in Parasitology, Toxoplasmosis Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Mas-Coma S, Bargues MD, Valero MA. Fascioliasis and other plant-borne ...
  • Rahimi P, Ghavami MB, Haniloo A, Nourian AA, Biglari AR. ...
  • Marcilla A, Bargues MD and Mas-Coma S. A PCR-RFLP assay ...
  • Mas-Coma S, Valero MA, Bargues MD. Fasciola, lymnaeids and human ...
  • Ai L, Chen MX, Alassad S, et al. Genetic characterization, ...
  • Inoue K, Kanemasa H, Inoue KA, Matsumoto M, Kajita Y, ...
  • Ashrafi K, Valero MA, Panova M, Periag ...
  • MV, Massoud J, Mas-Coma S. Phenotipic analysis of adults Fasciola ...
  • Itagaki T, Sakaguchi K, Terasaki K, Sasaki O, Yoshihara S, ...
  • Raina OK, Jacob SS, Sankar M, Bhattacharya D, Bandyopadyay S, ...
  • Assmar M, Milaninia A, Amir-Khani A, Yadegari DA, Forganparast K, ...
  • Gasser RB. PCR-based technology in veterinary parasitology. Vet Parasitol ۱۹۹۹; ...
  • Gasser RB, Newton SE. Genomic and genrtic research on burst ...
  • Sahba GH, Arfaa F, Farahmandian I, Jalal ...
  • H. Animal fascioliasis in Khuzestan, southwestern Iran. Journal of Parasitology ...
  • Muller R. Worms and Human Diseases. Wallingford, Oxon, UK: CABI ...
  • Rokni MB, Mirhendi H, Mizani A, Mohebali M, Sharbatkhori M, ...
  • Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular Cloning: A Laboratory ...
  • Huang L, Hu E, Lackovich J, Park K, Lee J, ...
  • Keohavong P, Thilly WJ. Fidelity of DNA polymerases in DNA ...
  • Zasada AA, Forminska K, Zacharczuk K. Fast identification of Yersinia ...
  • Periago MV, Valero MA, El-Sayed M, Ashrafi K, El Wakeel ...
  • Rokni MB. The present status of human helminthic diseases in ...
  • Lin RQ, Dong SJ, Nie K, Wang CR, Song HQ, ...
  • Itagaki T, Kikawa M, Terasaki K, Shibahara T, Fukuda K. ...
  • Iwen PC, Hinrichs SH, Rupp ME. Utilization of the Internal ...
  • Hung GC, Jacobs DE, Krecek RC, Gasser RB, Chilton NB. ...
  • McKened JB. Molecular diagnosis of parasitic nematode. Parasitology ۱۹۹۸; (suppl ...
  • Mahami-Oskouei M, Dalimi A, Forouzandeh-Moghadam M, Rokni MB. Molecular Identification ...
  • نمایش کامل مراجع