انتخاب اختصاصی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی به کمک پروتئین A در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 68
فایل این مقاله در 11 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-24-120_005
تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ یکی از قدرتمندترین روش های ساخت قطعات آنتی بادی در محیط آزمایشگاه است. با این حال یکی از مشکلات تکنیکی در مسیر انتخاب آنتی بادی های اختصاصی و عملکردی وجود فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی در کتابخانه آنتی بادی فاژ است. هدف از این مطالعه استفاده از قابلیت اتصال کلون های موجود در کتابخانه آنتی بادی فاژ به پروتئین A برای خالص سازی فیزیکی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی از فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی است.
مواد و روش ها: کتابخانه آنتی بادی فاژ Tomlinson طبق پروتکل مربوطه تکثیر شد. انتخاب آنتی بادی علیه گیرنده HER۲ در سطح سلول VERO انجام شد. سه چرخه panning در دو گروه صورت گرفت به صورتی که در یک گروه قبل از هر چرخه panning فاژهای تولید شده به وسیله پروتئین A متصل به آگاروز خالص سازی شدند، در حالی که در گروه کنترل مرحله خالص سازی با پروتئین A صورت نگرفت. آنتی بادی های به دست آمده در انتهای هر چرخه در دو گروه مورد مطالعه به وسیله PCR و phage-ELISA مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها: نتایج آزمون PCR نشان دهنده افزایش قابل ملاحظه تعداد فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی پس از خالص سازی توسط پروتئین A در انتهای چرخه سوم panning (۸۷ درصد) نسبت به گروه کنترل (۴۱ درصد) است. بعلاوه نتایج آزمون الیزا نیز تایید انتخاب و تکثیر اختصاصی آنتی بادی در گروه فاژ خالص شده با پروتئین A است.
استنتاج: این مطالعه اهمیت خالص سازی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی را برای تولید و انتخاب آنتی بادی های اختصاصی را در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ نشان می دهد.
کلیدواژه ها:
Antibody phage display library ، protein A ، HER۲ ، Insert-free phage ، کتابخانه آنتی بادی فاژ ، پروتئین A ، HER۲ ، فاژ فاقد قطعه آنتی بادی
نویسندگان
رضا ولدان
Institute of Biotechnology, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad
علیرضا رفیعی
Molecular and Cell Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari
غلامرضا هاشمی تبار
Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad
محمدرضا باسامی
Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :