بررسی اثر ضدسرطانی لانتی بیوتیک Lacticin ۳۱۴۷

مقدمه بیشترین نوع سرطان مربوط به سرطان پوست بخصوص در مردان است. Lacticin ۳۱۴۷، باکتریوسینی از خانواده لانتی بیوتیک هاست. هرچند هنوز شواهدی برای اثرات ضدسرطانی آن گزارش نشده است، به دلیل مشابهت به نایسین برای بررسی این اثر درنظر گرفته شد. هدف بررسی اثر Lacticin ۳۱۴۷ بود. روش کار ابتدا سلول های A۴۳۱ کشت داده شدند و سنجش بقای سلولی و میزان سمیت سلولی Lacticin ۳۱۴۷ بر سلول های کارسینومای اپیدرموئید انسانی A۴۳۱ پس از ۲۴ و ۴۸ ساعت تیمار توسط روش رنگ سنجی MTT Assay بررسی شد. آپوپتوز سلولی با سنجش فعالیت کاسپازهای ۸ و ۹ در سلول های سرطانی A۴۳۱ تیمار شده با غلظت IC۵۰ Lacticin ۳۱۴۷ پس از ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت بررسی شد. از روش Boyden Chamber جهت ارزیابی توانایی تهاجم سلول های سرطانی A۴۳۱ تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin ۳۱۴۷ استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی برای ژن های پروآپوپتوتیک Bax، آنتی آپوپتوتیک Bcl-۲ و ژن مرجع ꞵ-actin طراحی و میزان بیان آن ها درسلول های A۴۳۱ تیمار شده با غلظت IC۵۰ Lacticin ۳۱۴۷ با استفاده از روش Real Time PCR کمی، مورد بررسی قرار گرفت. تجزیه و تحلیل داده ها توسط نرم افزار SPSS ۱۶ و آزمون آماری ANOVA انجام گردید ( ۰۵/۰(P<. نتایج بررسی آماری داده های به دست آمده از آزمون MTTنشان داد که رشد سلول های تیمار شده با غلظت های مختلف Lacticin ۳۱۴۷ به طور معنی داری کاهش پیدا کرده است (۰۰۱/ ۰p<). تاثیر مهاری Lacticin ۳۱۴۷ بر زنده مانی سلول های A۴۳۱ وابسته به غلظت و زمان تیمار است. به طوری که بیشترین تاثیر درغلظت µM ۳/۰ و مدت ۷۲ ساعت مشاهده شد. غلظت IC۵۰ Lacticin ۳۱۴۷ برابر باµM  ۸/۰ به دست آمد. فعالیت کاسپازهای ۸ و ۹ در سلول های سرطانی A۴۳۱ تیمار شده به صورت وابسته به زمان افزایش یافت و پس از ۷۲ ساعت نسبت به کنترل به ترتیب ۳۶/۲ و ۷۲/۲ برابر شد (۰۰۱/ ۰p<). توان تهاجم سلول های سرطانی A۴۳۱ تیمار شده با دوز زیرکشنده Lacticin ۳۱۴۷ به طور وابسته به دوز کاهش یافت و در غلظتµM  ۵/۰ با حداقل اثر کشندگی، کمترین توان تهاجم را نشان داد (۰۰۱/۰>p). نتیجه گیری بیان ژن پروآپوپتوتیک Bax در سلول هایA۴۳۱ تیمار شده با غلظت IC۵۰ Lacticin ۳۱۴۷ به طور قابل ملاحظه ای (۰۰۱/۰>p) افزایش یافت. همچنین کاهش بیان ژن آنتی آپوپتوتیک Bcl-۲ در همان شرایط معنی دار بود. درنتیجه، استفاده از Lacticin ۳۱۴۷ در آینده ممکن است به یک استراتژی جدید برای درمان سرطان پوست منجر شود.