Improvement of Large-scale PRP production by Haemophilus influenzae typeb, using modified CY medium

زمینه و هدف : هموفیلوس آنفلوانزا، نوعی باسیل گرم منفی است که سویه های مختلف آن در دو گروه کپسول دار و بدون کپسول طبقه بندی شده اند. هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ، یکی از عوامل شایع مننژیت نوزادان و کودکان زیر ۵ سال در سراسر جهان می باشد که از کپسول پلی ساکاریدی آن موسوم به پلی ریبوزیل ریبیتول فسفات ( PRP ) جهت تولید واکسنهای کونژوگه گلیکوپروتئینی علیه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b استفاده شده است. هدف از انجام این مطالعه، بهبود شرایط کشت هموفیلوس آنفلوانزا به منظور افزایش تولید PRP در مقیاس نیمه صنعتی است. مواد و روش ها: سویه استاندارد هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ابتدا در فرمانتورهای ۲ لیتری حاوی محیط CY (کازآمینواسید- عصاره مخمر) با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده گلوکز، عصاره مخمر، Hemin و NAD (نیکوتینامید آدنین دی نوکلئوتید) کشت داده شد و سپس بذر تلقیحی بطور مجزا وارد فرمانتور ۵۰ لیتری با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده مواد فوق گردید. پس از هربار فرمانتاسیون، میزان توده سلولی و تولید PRP مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: با استفاده از محیط کشت CY (کازامینواسید- عصاره مخمر) اصلاح شده ( گلوکز : ۶ ، عصاره مخمر : ۵/۲، Hemin : ۰۳/۰ و ۰۱۵/۰ NAD : گرم برلیتر) و فرمانتاسیون در فرمانتور ۵۰ لیتری ، وزن خشک سلولی و غلظت PRP بترتیب به حدود ۲/۵ و ۱/۱ گرم برلیتر رسید که در مقایسه با محیط کشت CY معمولی ، بطور معنی داری افزایش نشان میداد. نتیجه گیری : در مجموع ، استفاده از محیط کشت CY اصلاح شده ، در کنار کنترل pH و اکسیژن محلول ، موجب افزایش و بهبودتولید PRP می گردد که بالطبع ، کاهش هزینه های تولید و در نتیجه ، کاهش قیمت تمام شده واکسنهای کونژوگه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b را به دنبال دارد.