تاثیر هارمالین بر بیان ژن Dnmt۱ و هیپومتیلاسیون پروموتور ژن P۱۵ در رده سلولی لوسمیک NB۴

چکیده سابقه و هدف متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتر ژنهای سرکوبگر تومور از جمله P۱۵ ، به عنوان یکی از مهمترین مکانیسمهای ایجاد بدخیمیهای خونی مطرح است .هارمالین یکی از آلکالوئیدهای مشتق شده از گیاه اسپند است که دارای خاصیت آنتیپرولیفراتیو بر روی رده های سلولی لوسمیک میباشد. در این مقاله تاثیر هارمالین بر کاهش بیان ژنDnmt۱  و هیپومتیلاسیون ناحیه پروموتر ژن P۱۵ در رده سلولی NB۴ مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها در این مطالعه تجربی با استفاده از روش MTT ، تاثیرات سیتوتوکسیک بر رده سلولی NB۴  تا ۷۲ ساعت بررسی شد. جهت بررسی چرخه سلولی پس از تیمار با هارمالین، از روش فلوسیتومتری استفاده شد. وضعیت متیلاسیون پروموتور ژن P۱۵ با استفاده از روش Methylation specific PCR بررسی شد. با استفاده از روش Real-time PCR ، میزان بیان ژن های Dnmt۱ و P۱۵ بررسی گردید. یافته ها نتایج نشان داد که داروی هارمالین از غلظت µg/mL ۱۵ به بالا، پس از ۴۸ ساعت به صورت وابسته به دوز و زمان دارای خاصیت آنتی پرولیفراتیو بر روی رده سلولی NB۴ می باشد. آنالیز چرخه سلولی نشان دهنده ایست سلول ها در فاز G۰G۱ است. هارمالین در غلظت µg/mL۱۵ موجب کاهش بیان ژن Dnmt۱ ، هیپومتیلاسیون پروموتور ژن P۱۵  و افزایش مجدد بیان ژنP۱۵  در رده سلولی  NB۴می‎شود. نتیجه گیری با توجه به اثر بخشی داروی هارمالین بر کاهش بیان ژن Dnmt۱ و هیپومتیلاسیون پروموتور و افزایش بیان ژن P۱۵ در این رده سلولی، می توان چنین پیشنهاد کرد که این دارو می تواند به عنوان یک راه کار درمانی مناسب به صورت منوتراپی و یا داروی مکمل همراه با دارو های متداول لوسمی پرومیلوسیتیک حاد مورد استفاده قرار گیرد.