افزایش بیان گیرنده آنتی ژن کایمریک بر سطح لنفوسیت های T به کمک الحاق ژنومی

چکید ه   سابقه و هدف   فعال سازی اختصاصی سیستم ایمنی به ویژه لنفوسیت های T ، یکی از اهداف اساسی در حوزه ایمونوتراپی سرطان است . به منظور القای سلول های ایمنی فرد بیمار، از گیرنده های کایمریکی که حاوی خاصیت اتصال ویژه به آنتی ژن ها هستند، استفاده شده است تا لنفوسیت های T سیتوتوکسیک را فعال کنند. گیرنده کایمریک، متشکل است از قسمت متصل شونده به آنتی ژن از آنتی بادی که از طریق یک مولکول اتصال دهنده خارج سلولی به ناحیه داخل غشایی و نیز دومین های سیتوپلاسمی شروع کننده سیگنالینگ لنفوسیتی متصل می باشد. هدف از این بیان پایدار و افزایش یافته CAR ( Chimeric Antigen Receptor ) بر سطح سلول های T ، فعال شدن موثر سیستم ایمنی بر علیه سلول های توموری بود.   مواد و روش ها   در یک مطالعه تجربی، نواحی متغیر آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری( VHH یا نانوبادی) به جای قسمت هدف گیرنده آنتی ژن در ساختار گیرنده کایمریک استفاده شد. برای بیان پایدار و افزایش یافته گیرنده کایمریک حاوی VHH ، از سیستم اینتگراز PhiC۳۱ به منظور الحاق ژن گیرنده کایمریک در داخل ژنوم سلول های T استفاده شد. سازه های بیان کننده گیرنده های کایمریک و اینتگراز PhiC۳۱ به داخل رده سلولی Jurkat ، کوترانسفکت گردیدند و بیان گیرنده های کایمریک در روزهای اول و سی ام بعد از ترانسفکشن، با روش semi-quantitative RT-PCR اندازه گیری شد.   یافته ها   نتایج تحقیق در روز سی ام نشان داد که کوترانسفکشن سازه های بیانی اینتگراز فاژ PhiC۳۱ و سازه های حاوی CAR ، منجر به بیان پایدار و افزایش یافته این گیرنده ها می شود.   نتیجه گیری   بر اساس نتایج تحقیق، آنزیم اینتگراز PhiC۳۱ ، قابلیت استفاده در ایمونوتراپی به واسطه سلول های T حاوی گیرنده کایمریک را دارد.