تثبیت آنزیم اوره آز روی نانو بیوفیبریل های آمیلوئیدی حاصل از آلبومین سرم گاوی

سال انتشار: 1396
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 42

فایل این مقاله در 15 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_EAB-6-3_001

تاریخ نمایه سازی: 22 آذر 1402

چکیده مقاله:

آنزیم اوره­آز (EC.۳.۵.۱.۵) از دسته هیدرولاز­ها است که هیدرولیز اوره را به آمونیاک و دی اکسیدکربن کاتالیز می­کند. این آنزیم کاربردهای مختلفی در متابولیسم نیتروژن، تهیه واکسن، کیت­های تشخیص اوره، صنایع نوشابه­سازی و غیره دارد. در این تحقیق از نانورشته­های آمیلوئیدی حاصل از آلبومین سرم گاوی به­عنوان بستری جدید برای تثبیت آنزیم اوره­آز استفاده شد. تولید نانو رشته های آمیلوئیدی با سه تکنیک طیف­سنجی کنگورد، اسپکتروفلوریمتری و اسپکتروپلاریمتری بهینه­سازی شده و رشته های حاصله با تصاویر میکروسکوپ الکترونی مورد تایید قرار گرفتند. سپس آنزیم اوره­آز با استفاده از مولکول­های گلوتارآلدهید و با ایجاد پل­های عرضی روی رشته­های آمیلوئیدی تثبیت شده و فاکتورهای سینتیکی آن با آنزیم آزاد مقایسه شدند. بیشترین میزان تولید رشته­های آمیلوئیدی پس از ۴۸ ساعت انکوباسیون آلبومین سرم گاوی با غلظت ۱۰ میلی­گرم بر میلی­لیتر و دمای ۷۰ درجه سانتی گراد در بافر سیترات-فسفات با pH برابر ۴ به­دست آمد. آنزیم تثبیت­شده نسبت به شکل آزاد دارای قابلیت نگه­داری و پایداری بیشتری بود و فعالیت ویژه بالاتر و نیز Km کوچکتری را نشان داد. دمای بهینه از ۴۰ به ۷۰ درجه سانتی­گراد و pH بهینه نیز از ۶ تا ۷ به ۶ تا ۹ در آنزیم تثبیت­شده بهبود یافت. بنابراین رشته های آمیلوئیدی با داشتن گروه­های شیمیایی مختلف، برای تثبیت آنزیم اوره­آز مناسب بوده­اند. بهبود ویژگی های سینتیکی و پایداری آنزیم اوره­آز در اثر تثبیت بر رشته­های آمیلوئیدی امکان استفاده گسترده­تر از این آنزیم را در صنایع مرتبط فراهم می­آورد.

نویسندگان

امیر آراسته

استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد رشت، رشت، ایران

ذوالفقار لطفی

دانشجوی دکتری، گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

محمد فضیلتی

استاد، گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایر

حبیب اله ناظم

استاد، گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Ali, S.M.U., et al.; (۲۰۱۱). Selective determination of urea using ...
  • Andrews, R. K., et al.; (۱۹۸۶). Jack Bean Urease (EC۳.۵.۱.۵). ...
  • Andrews, R. K., et al.; (۱۹۸۶). Jack bean urease (EC ...
  • Blakeley, R. L.; Zerner, B.; (۱۹۸۴). Jack Bean Urease: The ...
  • Carballo, M., et al.; (۱۹۹۲). Evaluation of a urease-based confirmatory ...
  • Cherny, I.; Gazit, E.; (۲۰۰۸). Amyloids: not only pathological agents ...
  • Chiti, F.; Dobson, C. M.; (۲۰۰۶). Protein Misfolding, Functional Amyloid, ...
  • Danial, E. N., et al.; (۲۰۱۵). Characteristics of Immobilized Urease ...
  • Dixon, N. E., et al.; (۱۹۷۵). Jack bean urease (EC ...
  • Fidaleo, M., et al.; (۲۰۰۶). Assessment of Urea Degradation Rate ...
  • Follmer, C.; (۲۰۰۸). Insights into the role and structure of ...
  • Gebbink, M. F., et al.; (۲۰۰۵). Amyloids-a functional coat for ...
  • Gras, S. L.; (۲۰۰۷). Amyloid Fibrils: From Disease to Design. ...
  • Gurung, N., et al.; (۲۰۱۳). A broader view: microbial enzymes ...
  • Holm, N., et al.; (۲۰۰۷). Aggregation and fibrillation of bovine ...
  • Huntington, G.; (۱۹۸۶). Uptake and transport of nonprotein nitrogen by ...
  • Jayawardena, N., et al.; (۲۰۱۷). Amyloid Fibrils from Hemoglobin. Biomolecules; ...
  • Khan, M., et al.; (۲۰۱۳). Kinetics and thermodynamic study of ...
  • Kim, J., et al.; (۲۰۰۶). Nanostructures for enzyme stabilization. Chemical ...
  • Lee, C., et al.; (۲۰۱۷). Improving the Stability of Cold-Adapted ...
  • Liversidge, G., et al.; (۲۰۱۱). Altering the Tumor Microenvironment. Drug ...
  • Luo, Z.; Fu, X.; (۲۰۱۰). Immobilization of urease on dialdehyde ...
  • Mankar, S., et al.; (۲۰۱۱). Nanomaterials: amyloids reflect their brighter ...
  • Masuda, Y., et al.; (۲۰۱۴). Improvement of thermal-stability of enzyme ...
  • Mobley, H. L. T., et al.; (۱۹۹۵). Molecular Biology of ...
  • Mohamad, N. R., et al.; (۲۰۱۵). An overview of technologies ...
  • Mulinari, F., et al.; (۲۰۱۱). Characterization of JBURE-IIb isoform of ...
  • Pilkington, S. M., et al.; (۲۰۱۰). Amyloid fibrils as a ...
  • Pithawala, K., et al.; (۲۰۱۰). Immobilization of urease in alginate, ...
  • Robinson, P. K.; (۲۰۱۵). Enzymes: principles and biotechnological applications. Essays ...
  • Sheldon, R.; (۲۰۰۷). Cross-linked enzyme aggregates, stable and recyclable biocatalysts, ...
  • Sheldon, R. A.; van Pelt, S.; (۲۰۱۳). Enzyme immobilisation in ...
  • Smith, P. T., et al.; (۱۹۹۳). Isolation and characterization of ...
  • Sujoy, B.; Aparna, A.; (۲۰۱۳). Potential clinical significance of urease ...
  • Wang, X., et al.; (۲۰۰۸). The molecular basis of functional ...
  • Wright, C. I., et al.; (۲۰۰۷). Herbal medicines as diuretics: ...
  • نمایش کامل مراجع