Expression of Recombinant Factor IX Using the Transient Gene Expression Technique
محل انتشار: مجله تحقیق در پزشکی مولکولی، دوره: 6، شماره: 2
سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: انگلیسی
مشاهده: 56
فایل این مقاله در 7 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_REMJ-6-2_005
تاریخ نمایه سازی: 22 دی 1402
چکیده مقاله:
Background: Pilot and large-scale production of recombinant proteins require the presence of stable clones, but the process of selecting stable clones is time consuming. Moreover, continuous clone culturing in large-scale production may cause loss of incoming plasmid and recombinant genes.
Considering the advancements in Transient Gene Expression (TGE) technology, the large-scale expression of factor IX (FIX) was investigated in HEK cells by the TGE technique.
Materials and methods: HEK cells were seeded in a cell factory, and then transfected by pcDNA-hFIX plasmid using calcium phosphate co-precipitation method. Stable HEK-hFIX cells were also seeded in a cell factory, separately. After adding vitamin K, recombinant FIX was quantified in conditioned media using an ELISA. Moreover, its functional activity was assayed using an aPTT test.
Results: The results showed that the expression and activity of FIX by TGE technology was, respectively, ۱.۶ and ۱.۵ times higher than that obtained through stable HEK-FIX cells. Since calculating the specific activity revealed that for all time periods it is ۰.۲ mU/ng, so the increase in activity is due to the increase in the amount of FIX.
Conclusions: HEK cells with higher transfectability seemed to be an appropriate alternative for transient expression for large-scale protein production. Furthermore, if rapid expression of recombinant proteins is intended, TGE can replace costly and low-yield methods.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
Jafar Vatandoost
Department of Biology, Hakim Sabzevari University, Sabzevar
Mohammad amin Azimifar
Department of Biotechnology, Sabzevar Branch, Islamic Azad University, Sabzevar, Iran
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :