تخلیص جزئی آنزیم کاتالاز از باکتری Kocuria ASB 107
محل انتشار: اولین همایش ملی دانشجویی بیوتکنولوژی
سال انتشار: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 2,001
نسخه کامل این مقاله ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NSCBIO01_114
تاریخ نمایه سازی: 30 فروردین 1392
چکیده مقاله:
پراکسیدهیدروژن ((H(2)O(2) به عنوان اکسیدانتی بسیار قوی که کاربردهای فراوانی در صنایع غذایی، بهداشتی، نساجی و... دارد، لازم است که به سبب اثرات سمی آن در فرایندهای نهایی تولید صنعتی حذف شود. کاتالاز آنزیمی است که(H(2)O(2 را تجزیه میکند. تولید آنزیم کاتالاز میکروبی میتواند بهطور وسیعی در بخشهای صنعتی مختلف مورد استفاده قرارگیرد. باکتری مقاوم به پرتوهای یونیزان Kocuria ASB 107 که از چشمه رادیواکتیو رامسر جداسازی و شناسایی شده است، در فاز لگاریتمی و ایستایی رشد خود قادر به تولید انبوه آنزیم کاتالاز با پایداری نسبی قابل توجهی میباشد، بنابراین کاندیدای مناسبی برای تولید صنعتی آنزیم کاتالاز میباشد. در این پژوهش برای تخلیص جزیی آنزیم کاتالاز از باکتری کوکوریا، بیومس حاصل از رشد باکتری در محیط TSA پس از 5 بار شست و شو، به نسبت 0.2gr/ml در بافر فسفات پتاسیم 50mM (pH:7) سوسپانسه شد و به منظور شکست باکتریها، محلول باکتری با لیزوزیم تیمار و سپس عصاره سلولی آن توسط سانتریفوژ جداشد. فعالیت کاتالازی عصاره سلولی برروی (H(2)O(2 و میزان O2 تولیدی توسط DOmeter اندازهگیری شد. بخشی از عصاره سلولی برروی Native-PAGE الکتروفورز گردید. پس از افزودن سوبسترا به ژل، با تعیین محل نوار کاتالاز در ژل، این محل به دقت بریده شد و سپس فعالیت کاتالازی در قطعات ژل جداشده بررسی گردید. باقیمانده ژل توسط کوماسی بلو رنگآمیزی شد. اندازهگیریهای DOmeter وجود فعالیت آنزیمی بالایی را در عصاره خام نشانداد. مقدار این فعالیت در نوارهای استخراج شده از ژل الکتروفورز افزایش یافت. پس از رنگآمیزی ژل با کوماسی بلو اسمیری از انواع پروتئینها ظاهرگردید که نشاندهنده جداسازی قابل توجه ناخالصیها است. افزایش فعالیت ویژه نیز تخلیص جزئی کاتالاز به این روش را تأیید میکند. در این پژوهش یک روش ساده و اقتصادی به عنوان اولین مرحله تخلیص جزئی آنزیم کاتالاز از Kocuria ASB 107 ارائه گردیده است، بطوریکه طی یک مرحله تخلیص، خلوص 1.7 برابری حاصل میشود.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
الهام سادات سید جواد جوادی
ایران، تهران، دانشگاه الزهرا(س)، دانشکده علوم پایه، گروه زیست شناسی
عزت عسگرانی
ایران، تهران، دانشگاه الزهرا(س)، دانشکده علوم پایه، گروه زیست شناسی
سیده زهرا موسوی نژاد
ایران، تهران، دانشگاه الزهرا(س)، دانشکده علوم پایه، گروه زیست شناسی