تعیین فعالیت اندوگلوکونازی Streptomyces sp. TBJ04 به روش ارزیابی کربوکسی متیل سلولاز (CMCase)

آکتینومیست ها از مهمترین موجودات مؤثر در تولید آنتی بیوتیک ها و آنزیم های خارج سلولی بویژه سلولاز محسوب می شوند. در این میان استرپتومایسس ها غالب ترین جنس آنها هستند و دارای بیشترین گونه های تولید کننده آنزیم سلولاز می باشند. Streptomyces sp.TBJ04 از کمپوست قارج خوراکی جدا شد و تست های بیوشیمیایی و مورفولوژیکی جهت تأئید آکتینومیست بودن آن انجام شد. بعد از استخراج DNA، زنجیره واکنش پلیمراز برای این گونه آکتینومیست توسط پرایمرهای اختصاصی 16SrDNA انجام شد. سپس فعالیت آنزیمی توسط روش ارزیابی کربوکسی متیل سلولاز (CMCase) تعیین شد. این باکتری در محیط کربوکسی متیل سلولز (CMC) 1%کشت داده شد. بعد از 72 ساعت محیط کشت در 10000xg به مدت 20 دقیقه سانترویفیوژ شد و عصاره رویی به عنوان منبع آنزیمی ناخالص به کاربرده شد. فعالیت سلولازی توسط افزودن کربوکسی متیل سلولاز حل شده در بافر فسظفات به عنوان سوبسترا در Ph های 5/7، 6، 6/5، 7، 8 و 9 در دمای °C65-54 درجه اندازه گیری شد. واکنش با افزودن DNS جوشاندن متوقف شد. این باکتری بالاترین فعالیت سلولازی خود را در دمای °C60 نشان داد که معادل 0/25 واحد در میلی لیتر بود. که می توان از آن به عنوان یک جدایه جهت تولید اندوگلوکونازی که در دمای بالا فعالیت می کند بهره برد.