همسانهسازی و بیان فاکتور رشد عصب انسانی نو ترکیب درE. Coli
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 733
فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CIGS13_0323
تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393
چکیده مقاله:
فاکتور رشد عصب، نوروتروفینی است که اولین بار در دهه 1950 توسطStanley Cohen و Rita Levi-Montalcinکشف و خالصسازی شد، این فاکتور از سه زیر واحدγ وβ،αساخته شده و فعالیت نورونوتروفیک آن مربوط به زیر واحدBمیباشد که نسخهبرداری و ترجمه آن منجر به تولیدpreproproteinمی گردد که عملکرد زیستی آن رشد، بقا و تمایز سلولهای عصبی بوده و باعث گردیده در درمان بیماریهای حاصل از انحطاط سیستم عصبی مورد توجه قرار گیرد. مطالعه بیشتر این فاکتور نیازمند حضور منبع نسبتاً ارزانی از آن میباشد. توسعه مهندسی ژنتیک، تولید و بیان پروتئینهای هدف را به شکل نوترکیب با استفاده از میزبانهای بیانی مختلف امکانپذیر ساخته است. بنابراین در این پروژه همسانهسازی و بیان فاکتور رشد عصب انسانی نوترکیب درE. coliهدف قرار گرفت. ژن کدکننده بخش matureزیرواحدBفاکتور رشد عصب انسانی برای بیان درE. coliبهینهسازی و سنتز و در وکتور بیانیpET32aتحت کنترل پروموتور T7کلون و درE. coli BL21(DE3 بیان گردید. این سویه علاوه بر داشتن نقص درadenosine triphosphate (ATP)-dependent outer-membrane protease OmpT وprotease Lonدارای کپی کروموزومی ازRNA پلیمرازT7 تحت کنترل پروموتورlacUV5 برای بیان پروتئینهای نوترکیب تحت کنترل پروموتورT 7 است. به کمک هضم آنزیمی و سپس تعیین توالی صحت کاست بیانی تأیید گردیدنتایج حاصل از آنالیز وسترن بلات محصول نوترکیب نشان داد که پروتئین نوترکیب بیان شده به دو صورت محلول و نامحلول بوده که بخش بیشتر آن به صورت محلول میباشد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
شبنم شمع ریز
پژوهشکده بیو تکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران
زهرا امینی بیات
پژوهشکده بیو تکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران
حمیده افقی
پژوهشکده بیو تکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران
مهسا قنبری مطلق
پژوهشکده بیو تکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران