اثبات نقص پروتئینCLIP1در ناتوانی ذهنی اتوزومال مغلوب

در راستای شناسایی و بررسی عملکرد ژنهای ایجاد کننده ناتوانی ذهنی اتوزومال مغلوب، پیش از این با استفاده از روشExome sequencingیک تغییر نوکلئوتیدی(g.12:122812682G>A)در ژنCLIP1 را در خانواده ای با علایم ناتوانی ذهنی، استرابیسموس، تشنج و آزوسپرمی، گزارش کرده بودیم. بررسی های تکمیلی برای سنجش اثرات این جهش بی معنی که سبب تبدیل کدون گلوتامین به یک کدون متوقف کننده زودرسp.Q1010 می شد، انجام شد. بررسی با روش هایRT- PCRوQuantitative RT-PCRو با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ایزوفورم یکNM_002956.2 و( NP_002947.1نشان داد که در سلولهای فرد بیمار سطحRNAبیش از 50 % کاهش داشته و فقط 25-30 % حالت طبیعی، بیان میگردد. وسترن بلات با استفاده از آنتی بادیهای اختصاصیCLIP1 را، در سلولهای افراد بیمار شناسایی نکرد؛ حال آنکه در سلولهای افرادسالم این خانواده و دو فرد سالم غیر وابسته، باند پروتئین طبیعی وجود داشت. عدم وجودCLIP1 در سلولهای فرد بیمار با یافته قبلی بهدست آمده از بررسی سلول فیبروبلاست دارای جهش با میکروسکوپ ایمونوفلورسانس مطابقت داشتاین نتایج بیانگر رخ دادنNonsense mediated decayبرای رونویسهایCLIP1 که دارای کدون متوقف کننده زودرس بودند، می باشد