تکثیر آمپلیکونهای ژن آلفا گلوبین در دو گونه از ماهیان خاویاری دریای خزر و استخراج توالی ژن و پروتئین آنها

هموگلوبین در موجودات پر سلولی با اتصال به اکسیژن و تحویل آن در اندام های مختلف بدن نقش حیاتی ایفا می کند. مطالعات وسیعی در رابطه با انطباق هموگلوبین ماهی ها با شرایط زیست محیطی متنوع انجام گرفته است. ماهی قره برون و ازون برون دو گونه بومیماهیان خاویاری دریاچه خزر هستند. ماهیان خاویاری قدمتی حدود 250 میلیون سال دارند و به همین علت به آنها فسیل زنده می گویند.از نظر تکاملی این رده از ماهی ها بین ماهیان استخوانی و ماهیان غضروفی قرار گرفته اند. توالی ژن و پروتئین آلفا و بتا گلوبین ماهیان خاویاری و یا خانواده ای که از نظر فیلوژنی به این ماهی ها نزدیک باشد در حال وجود ندارد.هدف ما شناسایی توالی ژن آلفا گلوبین ماهی قره برون و ازون برون از تاسماهیان بود که بکمک طراحی 4 جفت پرایمر دژنره انجام گرفت لازم بذکر است که این پرایمر ها بر اساس توالی آمینواسید پروتئین آلفای ماهیان نزدیک به این خانواده انجام گرفت. جهت انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز و تکثیر قطعه هدف ازDNAاستخراج شده، از خون ماهیان مورد مطالعه استفاده شد. سپس آمپلیکون هایPCRدر هر ماهی تعیین توالی گردیده و در ژن آلفا گلوبین ماهی قره برون 808 نوکلئوتید و در ماهی ازون برون 877 نوکلئوتید شناسایی شد. با ترجمه این توالی نوکلئوتیدی به آمینواسید های آلفا گلوبین در هر ماهی 149 آمینواسید بدست آمد. با آنالیز های بیوشیمیایی که بر روی این توالی های آمینواسیدی آلفا گلوبین انجام گرفت، بین خواص فیزیکوشیمیایی پروتئین آلفا گلوبین وعمق محیط زیست این دو ماهی ارتباط نزدیکی مشاهده گردید