ساخت همسانه عفونت زا و اثبات بیماریزایی یک جدایه با ژنوم تک بخشی ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی از استان کرمان

ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجهفرنگی(Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV) یکی از مهم-ترین ویروس های گوجه فرنگی درسرتاسر دنیا است. در تحقیق حاضر به منظور ساختن سازه عفونتزایTYLCVجدایه جیرفت با ژنوم تک بخشی، طول کامل ژنوم ویروس که قبلا درون پلاسمیدPromega (pGEM®-T)بنامpGEMT2.9همسانهسازی شده بود با آنزیمPstIبریده شد. سپس دو طول کامل ژنوم درون پلاسمید دوگانهpGreen0029 قرار داده شد و سازه دوتایی ساخته شده ابتدا به سلولهای باکتریEscherichia coliوسپس به سلولهایAgrobacterium tumefaciens نژادC58 منتقل شد. جهت اثبات بیماریزایی سازه به دست آمده، مایه زنی روی سه رقم گوجهفرنگی بعنوان میزبان اصلی این ویروس انجام گردید. یک هفته بعد از مایه زنی، علائم بیماری روی گیاهان تلقیح شده شامل پیچیدگی برگها، کوچک شدن اندازه برگها، زردی حاشیه برگها و کوتولگی گیاه ایجاد گردید. آلودگی گیاه گوجهفرنگی توسط آزمون PCR با استفاده از آغازگرهای عمومی تأیید شد. علاوه بر این، عکس العمل تعدادی از گیاهان دیگر شامل یک رقم هر کدام فلفل هندی ،(Capsicum annuum L.)فلفل دلمه ایCapsicum annuum L.)لوبیا Phaseolus vulgaris L.) خیارCucumis sativus L.)و پنج رقم از انواع توتون در برابر مایه زنی با این سازه مورد بررسی قرار گرفت