جداسازی و شناسایی مو لکولی ویروس های برونشیت عفونی طیور در مرغداریهای صنعتی ایران

هدف: شناسایی مولکولی ویروس های برونشیت عفونی طیور به روش RT-PCR/RFLPs از مرغداریهای صنعتی ایران. طرح: مطالعه طولی بین سالهای 1382-1377. نمونه ها: نمونه های بافتی نای، کلیه و ریه گله های مشکوک به بیماری تنفسی، روش: نمونه های بافتی ارجاع شده به آزمایشگاه ویروس شناسی طیور بخش بیماریهای طیور دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، طی سالهای 1382-1377 از گله های گوشتی و تخمگذار به تخم مرغهای جنین دار 9-8 روزه تلقیح شد. 12 جدایه از ویروس هایی که در پاساژ سوم باعث تأخیر در رشد جنین، رسوب اورات در مزونفرون ها یا مرگ جنین شده و ا ز نظر هماگلوتیناسیون گلبول قرمز مرغ منفی بودند و همچنین 5 سویه رفرانس 793/B, D274, M41, D1466, H120 برای آزمایشات مولکولی RT-PCR/RFLPs انتخاب شدند. RNA ویروس استخراج و به کمک آنزیم رونوشت برداری معکوس به cDNA تبدیل و متعاقب آن به کمک تکنیک PCR ژن گلیگوپروتئین S1 با پرایمرهای اختصاصی گروه تکثیر شد و در نهایت محصول PCR با استفاده از ژل آگار 1 درصد الکتروفورز شده و نمونه های مثبت در PCR که باند اختصاصی بیش از 1600 جفت باز را نشان می دادند توسط آنزیم های محدودگر Has III, Ecor I, Hilnd III هضم شده و الگوهای هضم آنزیمی (RFLPs) نمونه های مثبت با الگوی RFLPs سویه های رفرانس 793/B, D274, M41, H120 با استفاده از ژل آگار 1درصد الکتروفورز و مقایسه شدند. نتایج: از 12 نمونه مثبت در RT-PCR، در هضم آنزیمی با 8, Hac III نمونه الگوی 793/B و بقیه الگوی تیپ Mass را در RFLPs نشان دادند. نتیجه گیری: با توجه به اینکه 793/B نسبت به سویه واکسینال H120 ماساچوست نوعی سروتیپ با همولوژی پایین بوده و می تواند تا حدودی مسئول واگیری برونشیت در گله های واکسینه و وجیه کننده شکست در واکسیناسیون این بیماری باشد، جداسازی و شناسایی این سروتیپ ممکن است مقدمه ای برای تغییر سیاست کنترل و پیشگیری علیه بیماری برونشیت عفونی باشد. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، (1383)، دوره 59، شماره3، 264-259.