افزایش کارایی انتقال ژن به سلول های گیاهی به روش زیست پرتابیبا استفاده از میکروذرات کاتیونی شده طلا

هدف این تحقیق، ساخت میکروذرات کاتیونی شده طلا و به کارگیری آنها جهت افزایش انتقال ژن به سلول های گیاهی به روش زیست پرتابی 1 است. سطح میکروذرات طلا با اندازه 1 میکرون در طی 2 مرحله کاتیونی شد. بدین منظور در مرحله اول، - با ایجاد گروه های کربوکسیلیک بر روی سطح میکروذرات طلا از طریق تشکیل یک تک لای هی خود آرا 2 از ملکول مرکاپتودودکانوئیک اسید (MDDA) و در مرحله دوم، با ایجاد پیوند کووالانسی بین گروه های آمینی مولکول های پلی اتیلن ایمین(PEI)و گروه های کربوکسیلMDDA سطح میکروذرات طلا با گروه های آمینی مولکول های PEI دارای بار مثبت شد. گروه های آمینی سطح میکروذرات طلا دارای قابلیت جذب الکتروستاتیک مولکول هایDNA که بار منفی قویی دارند، هستند. با استفاده از آنالیز طیف سنج فوتوالکترون پرتو ایکس ،(XPS) نشان داده شد میزان نیتروژن اتمی که نشانگر وجود گروههای آمینی بر روی سطح هستند از صفر درصد بر روی سطح اصلاح نشده به حدود 8/7 درصد اتمی بر روی سطح کاتیونی شده می رسد.اثر افزیش غلظت نمک در بافر بر میزان جذب DNA بر روی ذرات کاتیونی شده نیز بررسی شد. نتایج نشان داد غلظت نمک باعث افزایش میزان جذبDNA توسط میکروذرات کاتیونی شده از0.37 بهparticles Au DNA.mg-1μg 0.87 می شود.در ادامه به منظور ارزیابی عملکرد میکروذرات کاتیونی شده طلا در انتقال ژن به سلول های گیاهی، از سامانه ژن گزارشگر gusبه منظور ارزیابی فعالیت ژن انتقال داده شده در کالوس های توتون تراریخته استفاده شد. شمارش تعداد نقطه های آبی حاصلاز فعالیت ژن انتقال داده شده، نشان داد میزان انتقال ژن توسط میکروذرات کاتیونی به طور متوسط دو برابر بیشتر از آن توسط میکروذرات اصلاح نشده است. افزودن نمک با غلظتmM 500 باعت شد انتقال ژن به طور متوسط سه برابر دیگرافزایش یابد.