تراریختی ژنوم کلروپلاستی گیاه توتون به روش زیست پرتابی و با سازهی ژنی پلی سیسترونیک

تکنولوژی گیاهان ترانسپلاستومیک جایگاه مهمی در مطالعات علوم پایه و بیوتکنولوژی دارد. دست ورزی ژنتیکی ژنوم پلاستیدی به ویژه ژنوم کلروپلاست، مزایای متعددی نظیر بیان بالا، توانائی بیان ژنهای چندگانه و عدم انتقال ناخواسته ژن خارجی توسط دانه گرده را فراهم نموده است. با توجه به این ویژگیها، علاقه زیادی برای بهکارگیری این سیستمها جهت مصارف کشاورزی، صنعتی و های پلی سیسترونی به منظور mRNA پزشکی وجود دارد. در این طرح از ماهیت پروکاریوتی کلروپلاست و توانایی آن در بیان (Internal Ribosome Entry تولید هم زمان چند پروتئین نوترکیب استفاده شد. از طریق تعبیه ی توالی داخلی اتصال ریبوزوم و در کنار ژن pKCZ جهش یافتهی باکتریایی با قدرت تحمل به علفکش گلایفوسیت در ناقل کلروپلاستی epsps ژن ،Site,IRES) ژن مقاومت به آنتی بیوتیک اسپکتینومایسین و استرپتومایسین) قرار گرفت. به این ترتیب یک ساختار اوپرونی و تحت ) aadA ساخته شد. تراریختی کلروپلاستها به روش زیستپرتابی و بر روی گیاه توتون انجام گرفت. با انجام مراحل prrn کنترل پروموتر 16 متعدد باززایی روی محیط انتخابی و آنالیزهای مولکولی بر روی گیاهان حاصل حضور سازهی حاوی ژنهای نامبرده در این گیاهان مورد تأیید قرار گرفت.