بهینه سازی تولید IGF-I نوترکیب انسانی در کشت غیرمداوم در اشریشیا کلی

هورمون رشد IGF-I یک پلی پپتید تک رشتهای 70 آمینو اسیدی با سه پیوند دی سولفیدی است. این پروتئین به دلیل برخی ویژگیها و فعالیت های بیولوژیکی از لحاظ بالینی کاربردهای زیادی دارد. در این پژوهش، تولید و بهینه سازی شرایط بیان پروتئین IGF-I با استفاده از سویهی نوترکیب ] pET15b-hIGF-I ] E. coli OrigamiB(DE3) در کشت غیرمداوم انجام شد. به منظور بهینه سازی شرایط تولید، اثر سه عامل دما (28 و 33 و 37 درجه سانتیگراد) ، مقدار القاگر (mM 0/5-0/3-0/1 ) و نوع محیط کشت ( LB-TB-TB+G ) با روش طراحی آماری آزمایش ها روی مقدار تولید IGF-I بررسی شد. نتایح حاصل از بهینه سازی داده ها نشان داد که بیشترین مقدار تولید پروتئین IGF-I در دما 28 درجه سانتیگراد و در محیط کشت TB+G است و مقدار القاگر کمترین تاثیر را بر تولید پروتئین دارد. در شرایط بهینه در کشت غیرمداوم g/l 0/771 پروتئین نوترکیب با میزان بیان 38% پروتئین کل بدست آمد. این مقدار پروتئین یکی از بالاترین مقادیر گزارش شده در سیستم غیرمداوم است.