بکارگیری روش PCR در تشخیص آلودگی کشت های سلولی به مایکوپلاسما سالیواریوم

مایکوپلاسما سالیواریوم، یکی از گونه های، مایکوپلاسمای اصلی آلوده کننده کشت های سلولی محسوب می شود و می تواند اثرات نامطلوبی را بر روی کشت های سلولی ایجاد کند، در نتیجه شناسایی این آلودگی و سرعت تشخیص آن، درکنترل و پیشگیری از این موضوع حائز اهمیت می باشد. که در این مطالعه، امکان تشخیص مولکولی مایکوپلاسماسالیواریوم با استفاده از روش کاملا اختصاصی واکنش زنجیره پلیمراز (PCR)، به عنوان یک روش سریع، حساس و اختصاصی برای تشخیص این آلودگی در کشت سلولی مورد بررسی قرار گرفت. به منظور راه اندازی این واکنش PCR از سوی استاندارد مایکوپلاسما سالیواریوم و پرایمرهای اختصاصی این گونه براساس تکثیرقطعه ای از ژن 16S rRNA استفاده شد و در ادامه حساسیت و ویژگی این تست تعیین گردید. نمونه های مورد بررسی پس از استخراج DNA، ازجهت آلودگی به جنس مایکوپلاسماو گونه سالیواریوم مورد آزمایش PCR قرار گرفتند. در این مطالعه، تعداد 62 نمونه از کشت های سلولی ارسالی به آزمایشگاه رفرانس مایکوپلاسما در موسسه رازی مورد بررسی قرار گرفت. که از این تعداد 42(67/75 درصد) نمونه از نظرآلودگی به جنس مایکوپلاسما و از این تعداد، 15(35/72 درصد)نمونه با ایجاد باند در 434bpاز نظر آلودگی به گونه مایکوپلاسما سالیواریوم مثبت بودند. براساس نتایج بدست آمده و بالا بودن درصد آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم، تست PCR راه اندازی شده، یک روش آسان، سریع، کم هزینه و در عین حال با حساسیت و ویژگی بالامی باشد که با بهره گیری از پرایمرهای مناسب و اختصاصی امکان شناسایی و تشخیص این آلودگی را در آزمایشگاه های کشت سلولی، درکمتر از یک روز، امکان پذیر می کند.