تایپینگ سالمونلاهای تیفوئیدی با روش تخلیص پروتئینهای محلول در آب و بکارگیری تکنیک SDS-PAGE

مقدمه و هد ف : سالمونلا ها از مهمترین باکتریهای خانواده انتروباکتریاسه هستند که موجب عفونتهای سیستمیک در انسان وحیوانات میشوند .هدف از این مطالعه جداسازی و تایپینگ سالمونلاهای تیفوئیدی با روش پلی اکریل آمید ژل الکتروفروزیسSDS-PAGE و مقایسه آن با روش سروتایپینگ میباشد. روش کار : در این مطالعه توصیفی مقطعی تعداد یکصد مورد سالمونلا که از آزمایشگاه های مراکز درمانی شهر همدان جمعآوری شده بود به همراه ٤ سویه رفرانس سالمونلا و ٥ سویه رفرانس دیگر از خانواده انتروباکتریاسه مورد آزمایش قرارگرفتند. سروتایپینگ نمونه ها با آنتی سرمهای منووالان بیومریو و دیفکو انجام گرفت و الکتروفورز پروتئین های ساختمانی آنهانیز در ژل ١٠ % پلی آکریل آماید انجام گرفت . پس از رنگ آمیزی ژل ها با آبی کوماسی ، اوزان مولکولی باندهای حاصل ازالکتروفورز سویه های مورد مطالعه با استفاده از منحنی مربوط به باندهای حاصل از پروتئین های استاندارد مشخص گردید وتوسط دستگاه دنسیتومتر مورد آنالیز قرار گرفتند.نتایج : از یکصد مورد سالمونلا ی جداشده از بیماران ٤٣ مورد ( ٤٣ %) مربوط به سالمونلا تیفی، ٢٠ مورد ( ٢٠ %) سالمونلا تیفیموریوم، ١٢ مورد( ١٢ %) سالمونلا پارا تیفی B؛ 10 مورد ( ١٠ %) سالمونلا پاراتیفی C ویک مورد سالمونلا پارا تیفی A و بقیه نیز غیر تیفوئیدی بودند . در روش الکتروفورز باندهای پروتئینی زیادی از مولکولهای بزرگ بیش از ٢٢٠ کیل و دالتون (KDa) تا مولکولهای کوچک کمتر از 18/5 کیلو دالتون بدست آمد که به خوبی باعث تمایز سویه ها از یکدیگر گردید و بر این اساس سالمونلا تیفی به ٥ زیرگروه و سالمونلا پارا تیفی B و C هرکدام به ٣ زیرگروه تقسیم شدند. همچنین الگوی پروتئینی سویه های رفرانس سالمونلا اختلاف عمده ای با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه از خود نشان دادند، با اینحال یک باندپروتئینی مشترک در ناحیه ٤٣ کیلو دالتون در مقایسه با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه مشاهده گردید. نتیجه نهائی : نتایج این مطالعه نشان داد که تخلیص پروتئینهای محلول در آب سالمونلاها با بکارگیری تکنیک SDS-PAGE میتواند بعنوان یک روش مطمئن تر از روش سروتاپی نگ در طبقه بندی و تایپینگ این ارگانیسمها مورد استفاده قرار گیرد . با اینحالتحقیقات بیشتری مورد نیاز است تا این روش بتواند جایگزین روشهای سروتایپینگ گردد.